[发明专利]一种球等鞭金藻的扩繁方法

说明书

本发明提供一种球等鞭金藻扩繁的方法，通过添加分离自球等鞭金藻中的一种藻际有益细菌来提高球等鞭金藻最高繁殖密度以及平台期维持时间；本发明个所使用的从球等鞭金藻中筛选的藻际有益细菌，其一种具体的菌株为交替单胞菌(Alteromonas sp.)NBU‑A‑0001菌株，其保藏编号为CCTCC M 2020010。本发明方法使球等鞭金藻的繁殖速度远高于常规微藻营养液培养微藻的速度，而最高繁殖密度以及平台期维持时间远高于常规培养营养液，在同样水体条件下可以提供更多的微藻供应，同时由于平台期较常不容易衰败，非常利于实际贝类规模化生产过程中微藻量控制和生产管理。

技术领域

本发明属于水产养殖饵料微藻培养技术领域，具体涉及一种球等鞭金藻扩繁的方法，能够有效提高球等鞭金藻最高繁殖密度以及平台期维持时间。

背景技术

球等鞭金藻(Isochrysis galbana)体形小，富含多糖、胡萝卜素以及高能量的脂类物质，尤其是富含贝类生长发育所需的不饱和脂肪酸DHA、EPA等，是所有滩涂贝类苗种繁育过程中必不可少的开口饵料。

目前国内外对球等鞭金藻的培养影响因素研究聚焦于光照、盐度、温度等环境因素对球等鞭金藻生长等方面的影响，培养基均是针对微藻营养需求的有机和无机营养成分，但即使尽量控制适合的环境条件和营养条件，实际大规模露天繁殖过程中，微藻的最高繁殖密度依旧不够高，非常容易衰败，不能满足贝类规模化苗种繁育的饵料需求。

研究表明，藻际细菌对微藻扩繁有着重要的影响。例如，噬纤维菌(Cytophagasp.)可通过直接攻击的方式抑制硅藻和鞭毛藻的扩繁(Imai et al.,1993)，亚硫酸杆菌(Sulfitobacter sp.)却可以通过分泌吲哚乙酸来促进硅藻的繁殖(Amin et al.,2015)。而目前实际微藻扩繁技术均没有考虑藻际细菌的影响。

发明内容

本发明目的是提供一种球等鞭金藻扩繁的方法，通过添加分离自球等鞭金藻中的一种藻际有益细菌来提高球等鞭金藻最高繁殖密度以及平台期维持时间，从而弥补现有技术的不足。

本发明所提供的球等鞭金藻扩繁方法，是在球等鞭金藻培养过程中，在球等鞭金藻扩培液添加从球等鞭金藻中筛选的藻际有益细菌；

所述的藻际有益细菌，一种具体的菌株为交替单胞菌(Alteromonas sp.)NBU-A-0001菌株，其保藏编号为CCTCC M 2020010，

本发明所提供的方法中所使用的扩培液，其一种组成如下：

50-200mg/L KNO₃、5-20mg/L KH₂PO₄、1-5mg/L Fe-citrate·5H₂O、0.01-0.1g/L红糖、2-10μg/L VB₁、0.01-0.1μg/L VB₁₂。

作为优选，所述的扩培液的一种具体组成如下：

100mg/L KNO₃、10mg/L KH₂PO₄、3mg/L Fe-citrate·5H₂O、0.06g/L红糖、6μg/LVB₁、0.05μg/L VB₁₂。

其中扩培液的一种制备方法如下：

1)将过滤的海水加入KNO₃、KH₂PO₄ Fe-citrate·5H₂O灭菌后备用；

2)将红糖在纯水中溶解，过0.22μm滤膜后，加入到步骤1)制备的灭菌溶液中；