[发明专利]一种修饰的单纯疱疹病毒

说明书

本发明涉及一种修饰的单纯疱疹病毒，其中该单纯疱疹病毒缺失功能性ICP34.5编码基因和功能性ICP47基因，并且来源于保藏号为CCTCC NO：V201810的病毒株。本发明还涉及包含该修饰的单纯疱疹病毒的组合物以及由该单纯疱疹病毒侵染的宿主细胞。

技术领域

本发明涉及一种修饰的单纯疱疹病毒，或称重组的单纯疱疹病毒以及其作为溶瘤病毒的用途。本申请所述的修饰的单纯疱疹病毒来源于疱疹病毒的非实验室病毒株。与实验室病毒株相比，本发明非实验室病毒株的重组病毒具有增强的溶瘤能力和/或基因传递能力。

背景技术

单纯疱疹病毒（Herpes Simplex Virus，HSV）属于疱疹病毒科，是有包膜的双链DNA病毒，包括I型（HSV-1）和II型（HSV-2）两个亚型。

单纯疱疹病毒由核心、衣壳、间层蛋白和囊膜四部分组成。病毒核心由浓厚的双链DNA构成，缠绕成纤丝卷轴。DNA外包围的衣壳呈二十面体结构，直径为100-110 nm，由162个壳粒组成。衣壳外由排列无规则、不定形的间层蛋白覆盖。病毒最外层是带短小突起的脂质双层囊膜，包裹囊膜的病毒直径为150-200 nm。病毒囊膜由11种糖蛋白和至少两种非糖基化蛋白质组成，包括病毒糖蛋白B（gB）、病毒糖蛋白C（gC）、病毒糖蛋白D（gD）、病毒糖蛋白G（gG）和病毒糖蛋白M（gM）等。病毒囊膜糖蛋白的立体结构对病毒的细胞侵染能力有关，其决定了病毒能否进入宿主细胞及进入宿主细胞的病毒量。

目前，HSV-1病毒己经用于肿瘤、神经系统退行性疾病、遗传性疾病和免疫系统疾病等重大疾病的基因治疗，相比其它基因治疗病毒载体，HSV-1病毒具有众多优势。

首先，HSV-1的基因组较大，可携带较大或多个外源基因。HSV-1基因组长达152kb，而腺病毒基因组仅有35 kb。HSV-1基因组的80多个已知基因中，约半数在体外培养中为非必需基因，可以被多个外源性治疗基因所替换，它的最大外源基因插入量可以达到30-40kb。这对于治疗许多疾病，尤其是多个基因相关的疾病尤其重要。

HSV-1侵染力强，溶瘤谱广，溶瘤效率高。HSV-1为有包膜病毒，具有高度感染性，侵染细胞的能力明显强于无包膜的腺病毒。HSV-1溶瘤谱广，可侵染广泛种类的肿瘤细胞。HSV-1复制周期短，溶瘤速度快，通常在12小时内完成一个复制周期。HSV-1转染的肿瘤细胞溶解后，可以释放数千个子代病毒体，这些病毒可以继续转染其它的肿瘤细胞。用Vero细胞系比较测定HSV-1与腺病毒的溶瘤活性，发现HSV-1的溶瘤活性比腺病毒高近10倍[KasuyaH,Takeda S, Nomoto S, et al.The potential of oncolytic virus therapy forpancreatic cancer.[J]. Cancer Gene Therapy, 2005, 12(9):725-36]。腺病毒载体临床人体用量为10⁹-10¹² pfu，而HSV-1载体临床人体用量为10⁵-10⁸ pfu，比腺病毒人体用量小1000倍。HSV-1除了通过细胞间隙扩展外，还可以通过细胞连接直接从一个细胞扩展到另一个细胞。这使得溶瘤病毒在实体瘤内既可有效渗透，同时几乎不伴有全身传播[Shen Y,Nemunaitis J. Herpes simplex virus 1 (HSV-1) for cancer treatment[J]. CancerGene Therapy, 2006, 13(11):975-992]。