[发明专利]一种用于培养高毒力金龟子绿僵菌的培养基及其制剂和应用

说明书

本发明公开了一种用于培养高毒力金龟子绿僵菌的培养基及其制剂和应用，属于植物保护技术领域。所述培养基由以下组分组成：麦麸、稻壳、大米粉、玉米粉、虫体冻干粉、磷酸氢二钾、硫酸锰、氯化钙、水。本发明在传统的培养基中引入了草地贪夜蛾虫体冻干粉，这不仅能提高金龟子绿僵菌NG‑Ma040对草地贪夜蛾的毒力，而且对产孢量的影响不显著。同时，麦麸、稻壳、大米粉、玉米粉、磷酸氢二钾、硫酸锰及氯化钙等各组分之间的协同配合，进一步提高对草地贪夜蛾的毒力，提升对草地贪夜蛾幼虫的侵染率和防治效果的作用。此外，本发明的培养基可以制作成金龟子绿僵菌制剂并用于防治防治草地贪夜蛾。

技术领域

本发明属于植物保护技术领域，具体地说，涉及一种用于培养高毒力金龟子绿僵菌的培 养基及其制剂和应用。

背景技术

金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)属于子囊菌门、肉座菌目、麦角菌科、绿僵菌 属，是一种广谱性的杀虫真菌。在自然界中主要进行无性繁殖，由昆虫体壁进行主动入侵而 感染不同昆虫，在昆虫血腔中可进行酵母状繁殖，产生大量虫菌体，同时可产生破坏素(des tuxin，非核糖体多肽类毒素)等杀虫毒素，抑制昆虫免疫、加速杀虫。已经发现金龟子绿僵 菌能够寄生的昆虫有200余种，对有些害虫已开发出绿僵菌杀虫剂，并收到良好防治效果。

随着草地贪夜蛾在我国定殖，防治由外来入侵害虫的应急防控迅速转为重要害虫的长期 防控工作，生物防治具有不污染环境、持续控制效果好的特点，将发挥越来越重要的作用， 研究表明金龟子绿僵菌对草地贪夜蛾具有良好的生防潜能，不易产生抗药性，因此利用金龟 子绿僵菌将是重要的生物防治手段。

目前国内外发酵金龟子绿僵菌的方法主要有液体深层发酵、固体发酵和液固双相发酵。 而液固两相发酵过程包括液体发酵和固体发酵2个阶段，充分结合了两者之长，利用液体发 酵快速生产大量的菌丝体或芽生孢子，再转到固体营养或惰性基质上使其产生最接近自然接 种体形态的气生分生孢子。该方法最大限度地利用了液体培养的优点，先生产大量的菌丝或 芽生孢子，缩短了菌丝生长周期，也避免了前期污染的问题，生产方法简便、能耗和成本低， 同时固相发酵产孢克服了液相发酵所产芽生孢子的环境稳定性差等缺点，因此被广泛用于金 龟子绿僵菌等杀虫真菌的批量生产。

毒力、侵染力、防效效果等是决定金龟子绿僵菌菌株应用前景的重要因素。目前金龟子 绿僵菌发酵基质中，多采用廉价的麦麸、玉米粉、大米粉等农副产品为营养物质，同时添加 无机盐促进菌丝生长，以达到最大孢子产量。优化基质组合过程中，几乎没有把提高金龟子 绿僵菌毒力、侵染力、防效效果等作为指标来考量，仅仅以孢子产量为目标。

金龟子绿僵菌NG-Ma040由安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所生物防 治团队从宁国玉米种植区调查发现田间有疑似感染虫生真菌的草地贪夜蛾僵虫中分离鉴定获 得，保藏号为CGMCC NO.19273，2020年1月17日保存于中国微生物菌种保藏管理委员会 普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

草地贪夜蛾作为金龟子绿僵菌NG-Ma040寄主，菌株可在草地贪夜蛾虫体上不断繁殖复 壮，通过人工饲养获得幼虫，经处理后可以作为发酵基质的重要组份。为了更好的发挥金龟 子绿僵菌NG-Ma040菌株生防潜力，研究出一种培养高毒力金龟子绿僵菌NG-Ma040的方法， 达到保持高产孢量和提高菌株毒力、侵染力、防效效果的目的，是一项亟待解决的技术问题。

发明内容

1、要解决的问题

针对现有技术尚无无法有效提高金龟子绿僵菌的毒力并用于防治草地贪夜蛾的问题，本 发明提供一种用于培养高毒力金龟子绿僵菌的培养基及其制剂和应用，它可以有效提高金龟 子绿僵菌的毒力并用于防治草地贪夜蛾。

2、技术方案

为解决上述问题，本发明采用如下的技术方案。