[发明专利]一种利用苦糖果越冬花芽诱导愈伤组织形成的方法

说明书

本发明公开了一种利用苦糖果越冬花芽诱导愈伤组织形成的方法，其包括，将苦糖果越冬枝条的花芽去掉外表皮，留存黄绿色的花芽幼嫩部位；将所述花芽幼嫩部位消毒，接种至培养基上培养；其中，所述培养基为MS基本培养基，附加6‑BA激素和/或IBA激素，所述6‑BA激素与所述IBA激素的质量比为1：(1～2)；所述培养的温度为26±1℃，光照强度为4000～6000lx，光照时长为12h的恒温培养箱进行培养15～25天。所述消毒，其为利用酒精、次氯酸钠、无菌水、升汞进行消毒。本发明通过对不同激素浓度进行优选，首次提出利用苦糖果越冬花芽作为供试材料促进其愈伤组织形成的方法，为苦糖果无性繁育方式填补空白。

技术领域

本发明属于植物生物技术领域，具体涉及一种利用苦糖果越冬花芽诱导愈伤组织形成的方法。

背景技术

苦糖果(Lonicera fragrantissima Lindl.et Paxt.subsp.standishii(Carr.)Hsu et H.J.Wang)属于忍冬科(Caprifoliaceae)忍冬属郁香忍冬的亚种。该植物种在中国广泛分布，多生长于海拔100-2000m向阳坡地内或溪涧旁。其果实具有较高的食用和营养价值。

近年来蓝莓和枸杞等小浆果植物种开发较为充分，创造了较好的经济和社会价值，开发新的小浆果植物品种，增添小浆果在市场中的占比份额势在必行。苦糖果属于小浆果类型植物，在中国零星分布，但集中人工种植较少，属于尚未开发的野生植物种质资源，致使其繁育的植物材料非常有限。通过组织培养等生物技术显然是能够快速繁育苦糖果的重要技术手段。

发明内容

本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。鉴于此，提出本发明。

作为本发明其中一个方面，本发明克服现有技术中存在的不足，提供一种利用苦糖果越冬花芽诱导愈伤组织形成的方法。

为解决上述技术问题，本发明提供了如下技术方案：一种利用苦糖果越冬花芽诱导愈伤组织形成的方法，其包括，将苦糖果越冬枝条的花芽去掉外表皮，留存黄绿色的花芽幼嫩部位；将所述花芽幼嫩部位消毒，接种至培养基上培养；其中，所述培养基为MS基本培养基，附加6-BA激素和/或IBA激素，所述6-BA激素与所述IBA激素的质量比为1：(1～2)；所述培养的温度为26±1℃，光照强度为4000～6000lx，光照时长为12h的恒温培养箱进行培养15～25天。

作为本发明所述的利用苦糖果越冬花芽诱导愈伤组织形成的方法的优选方案，其中：所述消毒，其为利用酒精、次氯酸钠、升汞进行消毒。

作为本发明所述的利用苦糖果越冬花芽诱导愈伤组织形成的方法的优选方案，其中：所述消毒，其为先用酒精浸泡，再用次氯酸钠浸泡，期间进行翻动，再用无菌水冲洗后用升汞浸泡，期间进行翻动；用无菌水冲洗后用无菌滤纸吸干表面水分即可。

作为本发明所述的利用苦糖果越冬花芽诱导愈伤组织形成的方法的优选方案，其中：所述培养基还包括蔗糖和琼脂粉，按质量份数计，所述蔗糖为300份，所述琼脂粉为90份。

作为本发明所述的利用苦糖果越冬花芽诱导愈伤组织形成的方法的优选方案，其中：所述培养基的pH为5.8。

作为本发明所述的利用苦糖果越冬花芽诱导愈伤组织形成的方法的优选方案，其中：所述培养基经121℃高温灭菌20min后，避光冷却保存待用。

作为本发明所述的利用苦糖果越冬花芽诱导愈伤组织形成的方法的优选方案，其中：所述接种，为保证所述花芽幼嫩部位基部有1～1.5mm嵌入所述培养基内。

作为本发明所述的利用苦糖果越冬花芽诱导愈伤组织形成的方法的优选方案，其中：培育的愈伤组织在分裂期形成的比例为10％以上。