[发明专利]一种雷帕霉素衍生物及其制备方法和应用

说明书

本发明属于医药领域，尤其涉及一种雷帕霉素衍生物及其制备方法和应用。所述雷帕霉素衍生物，结构式如下：通过菌株培养、种子培养、转化培养，转化得到雷帕霉素衍生物。本发明通过微生物转化方法，获得新的雷帕霉素衍生物，具有抗肿瘤作用。该化合物目前很难通过化学半合成方法制备。

技术领域

本发明属于医药领域，尤其涉及一种雷帕霉素衍生物及其制备方法和应用。

背景技术

雷帕霉素(rapamycin),又名西罗莫司(sirolimus)，是含氮三烯大环内酯类化合物，由吸水链霉菌AY B-994或吸水链霉菌FC904发酵产生，具有免疫抑制、抗真菌、抗增殖和抗肿瘤作用。雷帕霉素在延长哺乳动物生命周期方面具有潜在作用。最新研究表明,雷帕霉素能恢复阿尔茨海默病(AD)实验小鼠的相应缺陷症状，恢复认知和记忆水平，降低大脑组织的损伤。雷帕霉素对AD病具有缓解作用。

目前通过化学半合成的方法对雷帕霉素进行结构改造获得一些衍生物，例如，雷帕霉素43位分别被羟乙氧基、甲氧乙氧基、四氮唑取代的衍生物依维莫司(everolimus，RADO0 1)、biolimus A9、zotarolimus均已作为药物支架的涂料应用于临床；依维莫司、替西罗莫司(temsirolimus，CCI-779，43位被丙二酯取代)及deforolimus(AP23573，43位被亚磷酸取代)正在作为mTOR抗肿瘤靶向药物在临床应用或正处于临床试验中，这些半合成的雷帕霉素衍生物在水溶性或无免疫抑制活性等方面优于雷帕霉素。

目前开发微生物转化是对化合物进行结构修饰的一条有效途径，针对结构复杂的化合物，产生化学半合成难以获得的新化合物。因此，申请人尝试采用微生物转化的方法以期获得新的雷帕霉素衍生物。

发明内容

本发明要解决的技术问题，在于提供一种雷帕霉素衍生物及其制备方法和应用。

本发明是这样实现的：

本发明首先提供了一种雷帕霉素衍生物，其特征在于：其结构式如下：

本发明还提供了所述雷帕霉素衍生物的制备方法，包括以下步骤：

(1)菌株培养

将菌株接种于保藏培养基，保存备用；所述菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)F9，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏日期为2013年06月19日，保藏编号为CGMCC NO.7764；

(2)种子培养

将菌株转接于种子培养基，28℃、220r/min振荡培养15～18h；

(3)转化培养

将菌株以3％的接种量接种于转化培养基，28℃、220r/min振荡培养24h时，加入转化底物雷帕霉素至终浓度为250ug/mL后在相同条件下继续培养48h，得到含雷帕霉素衍生物的转化液。

所述种子培养基和转化培养基(以g/100mL计)：可溶性淀粉2.4，葡萄糖0.1，酵母浸出汁0.3，蛋白胨0.3，K₂HPO₄·3H₂O 0.1,MgSO₄·7H₂O 0.05，pH自然。

进一步地，所述转化底物雷帕霉素，母液为30mg/mL，以乙醇配制。