[发明专利]一种针对微量、降解检材的mini-STR试剂盒

说明书

本发明公开了一种针对微量、降解检材的mini‑STR试剂盒，包括20对核心基因座的特异性扩增引物,所述特异性扩增引物的核心PCR产物均小于250bp，其中STR基因座为:D16S539、D18S51、D21S11、D2S441、D13S317、FGA、D7S820、Amelogenin、D3S1358、D12S391、CSF1PO、D1S1656、THO1、D19S433、D8S1179、D10S1248、THOX、vWA、D5S818及D2S1338。本发明，建立的20个基因座的迷你型扩增体系,扩增子片段进一步缩短，均控制在250bp以内,提高了降解检材中基因座的检出数目；针对微量、降解等疑难检材的检测,具有快速、灵敏度高和适应性强的优点；适用于高度降解或抑制剂含量高的疑难样本,在实际应用中可成功获得白骨化尸骨、牙齿、趾甲、接触性脱落细胞、陈旧案件检材样本等特殊生物检材的STR分型。

技术领域

本发明涉及法医DNA检测领域，具体涉及一种针对微量、降解检材的mini-STR试剂盒。

背景技术

我国对STR DNA的数据库建设逐步标准化。根据中华人民共和国公共安全最新行业标准规定中国的常染色体核心基因座为20个，近年美国FBI也在原来13个CODIS基因座基础上增加到20个核心基因座，此外欧洲也颁布了欧洲标准(ESS)的核心基因座，这些核心基因座的并集为Amelogenin、D18S51、D21S11、D3S1358、FGA、D8S1179、vWA、CSF1PO、D16S539、D7S820、D13S317、D5S818、D2S1338、D19S433、TH01、TPOX、D6S1043、Penta D、Penta E、D12S391、D1S1656、D2S441、D22S1045、D10S1248和SE33。因此，现在各大厂商应用于DNA数据库建设的试剂盒都基本上涵盖了上述基因座，比如ABI AmpFeSTRglobal filer、PromegaPowerPlexfusion、Qiagen Investigator 24plex、公安部物证鉴定中心DNATyper25、基点认知的25A、海尔施的STRtyper26G、阅微基因的28A等，这些试剂盒的出现使得身份鉴定识别能力大大加强。

而在公安刑事案件方面，这些年来新试剂盒的发展并没有给案件DNA检测带来质的飞跃。目前公安系统刑事案件检测应用的产品均为外企厂商生产，内企试剂盒产品的应用还比较空白，主要是内企厂商的试剂盒在性能上，比如灵敏度、抗抑制能力，稳定性等不如外企厂商的产品。而外企的案件检测试剂盒产品还是Promega PP21等为主力，位点数更多的试剂盒比如ABI AmpFeSTR global filer、PromegaPowerPlexfusion等在案件检测应用中并没有优势。这是因为刑事案件的生物学检材往往是微量、腐败、降解或陈旧的，面对这类困难检材DNA检测，外企的试剂盒产品也显得比较苍白无力，往往只能得到少数几个基因座的分型结果，难以成为有效的DNA证据。

另外公安系统还积压有不少陈年旧案，因当时的DNA检测技术还比较落后没有办法处理。对于陈年案子的检材，因当时保存条件有限，使得案件生物学检材的DNA物质发生了严重的降解，检测结果往往也是无效的，终其原因是陈年案子的案件检材DNA物质发生严重的降解，使得现有的试剂盒技术难以得到有效的DNA分型结果。由此中国发明专利CN106521013B公开了一种针对微量、降解检材的STR试剂盒及其应用，建立了17个基因座的迷你型扩增体系，能够快速检出。但基因座的数目已经不符合国家要求，仍有一些检材的检测无法覆盖全面。

有鉴于此，为了解决这个DNA降解检材的检测问题，亟需开发一种新的STR试剂盒分型技术，来满足检测陈旧降解的DNA检材物质，提高检公安检测的效率、灵敏度。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是现有的DNA检测试剂盒由于检材的降解产生的检出率低，无效率高的问题。