[发明专利]一种利用二硫化铂的葡萄糖比色检测法

权利要求书

1.一种利用二硫化铂的葡萄糖比色检测法，其特征在于，首先利用葡萄糖氧化酶氧化葡萄糖生产葡萄糖酸和过氧化氢，再用二硫化铂为催化剂催化生成的过氧化氢与显色剂的显色反应来检测葡萄糖的浓度。

2.根据权利要求1所述的利用二硫化铂的葡萄糖比色检测法，其特征在于，主要包括如下步骤：

步骤1，首先对样品进行预处理，加磷酸二氢钠缓冲溶液稀释后，再加入葡萄糖氧化酶溶液混合、反应；

步骤2，加入的二硫化铂溶液，显色剂以及的磷酸二氢钠缓冲液进行显色反应；

步骤3，通过目视比色法或者紫外-可见分光光度计法检测。

3.根据权利要求2所述的利用二硫化铂的葡萄糖比色检测法，其特征在于，所述步骤3中，目视比色法是指，将显色反应后的溶液颜色直接与比色标准系列进行比较，或在显色反应后加入硫酸溶液终止反应，再采用目视比色法半定量测定葡萄糖的浓度。

4.根据权利要求3所述的利用二硫化铂的葡萄糖比色检测法，其特征在于，所述比色标准系列的制备方法如下：是将葡萄糖标准品加磷酸二氢钠缓冲液稀释，配制成已知的不同浓度的葡萄糖标准溶液与葡萄糖氧化酶混合反应后，加入二硫化铂溶液、显色剂和缓冲液进行显色反应即得比色标准系列，或在显色反应后加入硫酸溶液终止反应得到比色标准系列。

5.根据权利要求2所述的利用二硫化铂的葡萄糖比色检测法，其特征在于，所述步骤3中，紫外-可见分光光度计法是指显色反应结束后，直接测定溶液的吸光度，或在显色反应后加入硫酸溶液终止反应，再采用紫外-可见分光光度计测定溶液的吸光度，并根据标准曲线方程计算葡萄糖的含量。

6. 根据权利要求5所述的利用二硫化铂的葡萄糖比色检测法，其特征在于，所述标准曲线方程的建立是将葡萄糖标准品加磷酸二氢钠缓冲液稀释，配制成已知的不同浓度的葡萄糖标准溶液与葡萄糖氧化酶混合反应后，加入二硫化铂溶液、显色剂和缓冲液，显色反应后直接采用紫外-可见分光光度计测定在652 nm波长处的吸光度，或在显色反应后加入硫酸溶液终止反应，再采用紫外-可见分光光度计在450 nm波长处测定吸光度，并以吸光度作为纵坐标，葡萄糖的浓度作为横坐标，绘制标准曲线并得出标准曲线方程。

7. 根据权利要求2所述的利用二硫化铂的葡萄糖比色检测法，其特征在于，所述步骤1和步骤3中，所用磷酸二氢钠缓冲溶液的pH值为3-9，浓度为0.1 mM。

8. 根据权利要求2所述的利用二硫化铂的葡萄糖比色检测法，其特征在于，所述步骤2中，所用磷酸二氢钠缓冲溶液的pH值为2-7，浓度为25 mM。

9.根据权利要求2所述的利用二硫化铂的葡萄糖比色检测法，其特征在于，所述步骤2中，显色反应所用的显色剂为3,3’,5,5’-四甲基联苯胺、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐或邻苯二胺中的任意一种。

10.根据权利要求2所述的利用二硫化铂的葡萄糖比色检测法，其特征在于，所述步骤2中，显色反应的温度为20~70℃。