[发明专利]一种肾上腺素缓释纳米粒及其制备方法

说明书

本发明公开了一种肾上腺素缓释纳米粒及其制备方法，将肾上腺素与马来酸酐混合后，投入到PBS缓冲液中，随后依次加入正十二烷、漆酶和脂酶，得到混合的反应液；在得到的反应液中通入空气，搅拌状态下反应一定时间；反应结束后，经超速离心分离沉淀，得到肾上腺素缓释纳米粒粗品；粗品经水洗后喷雾干燥，即得。本发明肾上腺素缓释纳米粒中由于漆酶的作用产生苯环间的氧化偶联，因此不易被机体代谢，达到长循环效果，能够极大的延长药物半衰期，能够在机体的脂肪酶的作用下，缓慢的降解，释放出肾上腺素，达到缓释的效果。

技术领域

本发明涉及一种肾上腺素缓释纳米粒及其制备方法，属于生物医用材料领域。

背景技术

肾上腺素用于心脏骤停的抢救和过敏性休克的抢救，也可用于其他过敏性疾病，如支气管哮喘、荨麻疹的治疗，与局麻药合用有利局部止血和延长药效。肾上腺素治疗支气管哮喘效果迅速但不持久。皮下注射3～5分钟即见效，但仅能维持1小时。治荨麻疹、枯草热等，皮下注射肾上腺素同样具有效果迅速但不持久的特点。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种具有缓慢释放，保持长时间药效的肾上腺素缓释纳米粒。

为了实现上述目的，本发明采取的技术方案如下：

一种肾上腺素缓释纳米粒的制备方法，包括如下步骤：

(1)将肾上腺素与马来酸酐混合后，投入到PBS缓冲液中，随后依次加入正十二烷、漆酶和脂酶，得到混合的反应液；

(2)在步骤(1)得到的反应液中通入空气，搅拌状态下反应一定时间；

(3)步骤(2)反应结束后，经超速离心分离沉淀，得到肾上腺素缓释纳米粒粗品；

(4)将步骤(3)得到的肾上腺素缓释纳米粒粗品经水洗后喷雾干燥，即得。

具体地，步骤(1)中，每10mlPBS缓冲液中加入的肾上腺素为0.2-0.5g，加入的马来酸酐为0.5-1g，加入的正十二烷为5-10ml，加入的漆酶为0.2-0.6g，加入的脂酶为0.2-0.6g。优选每10mlPBS缓冲液中加入0.4g肾上腺素，0.8g马来酸酐，7ml正十二烷，0.5g漆酶以及0.55g脂酶。

优选的，步骤(1)中，所述PBS缓冲液pH值为5.0-6.5，最优选为6.0；缓冲离子浓度为80～100mmol/L，最优选为90mmol/L。

优选地，步骤(1)中，所述漆酶的比活力为200-400U/g，最优选为300U/g。所述脂酶的比活力为150-500U/g，最优选为400U/g。其中，漆酶的比活力测试方法利用苏州科铭生物技术有限公司的漆酶试剂盒(货号QM-2-G)进行测定；脂酶的比活力测试方法：A液(在5ml正十二烷中加入10mg乙酸酐和10mg丁香酚)，B液(10mg脂酶充分分散在5ml正十二烷中)，在30℃下将A液B液充分混合，并持续涡旋10min后，冰浴10min，用高效液相色谱测定乙酸丁香酚酯的浓度。

HPLC法测定乙酸丁香酚酯的浓度：色谱柱Inertsil DOS-SP(4.6mm×250mm，5μm)，柱温35℃，流动相：甲醇:乙腈:水＝29:29:42，流速1.0ml/min，检测波长280nm，进样量：20μl。

漆酶的作用是氧化交联肾上腺素分子，形成聚集核心。肾上腺素在漆酶作用下，酚羟基形成3种苯半醌自由基形式，它们之间可以进行随意的共价连接，形成6种二聚体，二聚体中苯环上氢还能继续转化为苯半醌自由基，继续与其他苯半醌自由基单元进行共价连接，最终形成复合共聚物，即聚集核心，如图1所示。

脂酶的作用是将马来酸酐通过酯键接枝到聚集核心的酚羟基上以及连接聚集核心，最终形成纳米颗粒并包覆在纳米颗粒的外表面。