[发明专利]追踪慢性进行性肝炎和肝纤维化程度的试剂盒及其用途

说明书

本发明用于迅速简便地检测早期的肝脏疾病，更具体地，涉及一种诊断试剂盒及其用途，所述诊断试剂盒使用针对α1‑酸性糖蛋白的单克隆抗体，通过该抗体测量作为肝损伤标记的去唾液酸‑α1‑酸性糖蛋白的浓度，以此追踪肝脏疾病的早期阶段即慢性进行性肝炎及肝纤维化程度。另外，本发明提供一种用于从血液样品中特异性测定慢性进行性肝炎和肝纤维化程度的试剂盒及免疫色谱条，其包含保藏号为KCTC13998BP的融合细胞系产生的针对α1‑酸性糖蛋白的单克隆抗体AGP601和与辣根过氧化物酶结合从而与去唾液酸‑α1‑酸性糖蛋白特异性结合的HRP‑RCAII结合物或GOLD(金)‑RCAII结合物。

技术领域

本发明涉及生物诊断试剂领域，本发明涉及一种追踪慢性进行性肝炎和肝纤维化程度的试剂盒及其用途，具体地，所述诊断试剂盒使用α1-酸性糖蛋白的单克隆抗体，通过该抗体测量肝细胞损伤标记物去唾液酸-α1-酸性糖蛋白(AsAGP)的浓度，以此用于追踪肝病的早期阶段即慢性进行性肝炎及肝纤维化程度。

背景技术

为了准确地早期诊断包括癌症在内的各种严重疾病，使用了各种血清学生物标记物进行筛选，并且寻找更好的血清学生物标记物的研究仍在继续。肝活检是诊断肝纤维化的标准诊断方法，但是由于组织采集错误而存在准确性问题，由于侵入性手术的风险和并发症的产生、检查者之间的熟练程度不同，它用于确诊肝病是有限制的。特别地，术后疼痛相对普遍，并且也曾有与检测相关的死亡报道。由于肝活检引起的许多问题，需进行肝组织活检的医生和接受活检的患者都有些抗拒，当需要重复检查时，肝组织活检变得更加困难。由于这个侵入性问题，以非侵入性方式预测肝纤维化的方法正在被研发中。

替代方法包括腹部超声检查和使用血清标记物的血清测试，目前，使用肝纤维化扫描的肝弹性测试被用作肝纤维化的非侵入性测量。

肝细胞即使有疾病也具有很强的再生功能，如果健康部位占正常组织的20％到30％，它们将几乎保持正常的功能。而用血清学诊断肝病,硬度病变在肝功能检查时有时也会显示无异常，多个测试结果之间相互无关联性的情况较多，因此需要通过各种测试进行全面检查。很难对于慢性肝病患者预测其严重纤维化或肝硬化的进展，作为标准测试方法的肝活检可能会通过侵入性方法引起与手术相关的并发症。

使用肝纤维化扫描(FibroScan)进行肝弹性测试的优点是可以通过非侵入的方式测量肝脏弹性来判断肝纤维化，但是根据患者身体状态弹性波未到达肝细胞以及波探头(wave probe)位置不正确的情况下无法进行测量，并且根据受测者的年龄和高身体质量指数，也存在难以进行肝弹性测试的问题。

由于这些问题，使用几种新的血清学生物标记物来诊断肝纤维化阶段的研究仍在进行中，并且需要开发出通过临床疗效较高的新型血清学生物标记物可以准确诊断肝纤维化阶段的诊断试剂。

慢性肝病是一种严重的疾病，预后较差，将来可能导致肝硬化，并且与发生率相比死亡率很高。特别是在包括韩国在内的肝炎病毒携带者较多的亚洲，发病率较高，因此，评价肝纤维化的程度是用于慢性肝病的早期诊断的重要部分。

在慢性肝炎中，若肝细胞炎症和坏死持续存在，则发生肝纤维化，肝纤维化进一步发展为肝硬化。为了在慢性肝病过程中更准确地评估和诊断肝纤维化，需要研发出血清学肝纤维化诊断的生物标记物，作为对目前使用的通过肝弹性测试测量肝纤维化程度的肝弹性测试(FibroScan，MRE)的补充。

被开发的肝细胞损伤生物标记物去唾液酸-α1-酸性糖蛋白(AsAGP)对追踪检查慢性进行性肝炎和肝纤维化的程度具有很高的特异性，因此可以推断它在诊断和治疗慢性肝病患者方面具有很高的临床实用性。

在现有技术中，通过测量血液中所含的去唾液酸-α1-酸性糖蛋白的浓度来诊断已超过慢性肝炎进展的肝硬化和肝癌的方法是已知的，但是现有技术是针对肝病已经进展到肝癌的程度才能进行诊断的方法，它难以诊断作为本发明的目的的肝脏疾病的初期进展即慢性肝炎和肝纤维化的程度。