[发明专利]一种双液相外周血中循环肿瘤细胞分离与检测装置及方法

权利要求书

1.一种双液相外周血中循环肿瘤细胞分离与检测装置，其特征在于，包括：有机玻璃样品池；有机玻璃样品池的上端开设有开口供溶液滴入，有机玻璃样品池的中部垂直设置有计数板，计数板两侧各有一个铂电极，计数板中央设置有一个贯通的检测门，有机玻璃样品池的底部设置有与样品池底部等面积的电磁铁；

检测时，有机玻璃样品池中的下层液体为葡聚糖溶液，上层液体为预处理后的外周血；癌细胞位于葡聚糖溶液界面上，通过所述铂电极施加直流电场后，癌细胞沿界面运动通过检测门被检测和计数；预处理具体为：向经红细胞裂解处理后的外周血样品中加入白细胞特异性磁珠溶液，磁珠溶液体积为外周血样品体积的十分之一。

2.根据权利要求1所述的双液相外周血中循环肿瘤细胞分离与检测装置，其特征在于，所述的铂电极一个固定在计数板上，另外一个固定在样品池内壁，铂电极垂直方向穿过有机玻璃样品池中的上层液体和下层液体。

3.根据权利要求1或2所述的双液相外周血中循环肿瘤细胞分离与检测装置，其特征在于，所述计数板的厚度为30-50μm，上端露出上层液体液面，下端距离样品池下部2-3mm。

4.根据权利要求1所述的双液相外周血中循环肿瘤细胞分离与检测装置，其特征在于，所述检测门位于计数板中央，且垂直于样品池下表面，其宽度为30μm，长度为1-2cm，检测门上下两端不与所述计数板上下两端连接。

5.根据权利要求1所述的双液相外周血中循环肿瘤细胞分离与检测装置，其特征在于，所述装置的电场强度为15-20V/cm。

6.根据权利要求1所述的双液相外周血中循环肿瘤细胞分离与检测装置，其特征在于，所述葡聚糖溶液的相对分子质量为450000-650000，浓度为10％。

7.一种基于权利要求1-6任一项所述双液相外周血中循环肿瘤细胞分离与检测装置的分离与检测方法，其特征在于，该方法用于非诊断目的，包括如下步骤：

S1、样品滴加：先滴加10％的葡聚糖溶液至到样品池的一半容积，随后滴加经过预处理后的人体外周血，形成双液相界面；

S2、细胞分离：打开电磁铁电源开关，已结合磁珠的白细胞受磁力吸引向下移动，并穿过双液相界面，到达溶液底部，外周血中的循环肿瘤细胞则停留在双液相形成的界面上；

S3、细胞检测：打开检测门两端的电源开关，界面上的癌细胞在电泳力作用下流向检测门并顺序通过检测门，每个细胞通过检测门时会产生一个电压脉冲信号，通过计数脉冲信号的个数即可计数样品中癌细胞的个数。