[发明专利]纤维蛋白原降解产物质控品及其制备方法

权利要求书

1.一种纤维蛋白原降解产物质控品的制备方法，其特征在于：其包括以下步骤：

1)称取0.05-0.30g的血纤维蛋白，放入容器内，进行搅拌，缓慢加入2—10mL的缓冲液，缓冲液的浓度为10—60mmol/L；

2)将步骤1的容器置于磁力搅拌器上，在室温下，以300-600RPM的转速搅拌5-15min，并避免血纤维蛋白附于容器壁上；

3)向步骤2的容器中加入40-150μl的溶血酶，溶血酶的浓度为0.01μg/μl—0.62μg/μl，在室温下以300-600RPM的转速搅拌5-15min，对血纤维蛋白进行酶切；

4)将磁力搅拌器转移至生化培养箱中，培养温度设定为25-40℃，磁力搅拌器继续搅拌8-16h；

5)将步骤4的磁力搅拌器移出生化培养箱，置于室温下，轻轻拍打容器，使容器壁上的附着物落入容器内，在室温下搅拌8-20min后，加入50-200μl的抑酶肽溶液，抑酶肽溶液的浓度20—500mg/ml；

6)在室温下搅拌10-40min后，将反应液转移至离心管中，将离心速度设置为6000G-12000G，离心10-30min；

7)将离心上清液转移至容器中，制得纤维蛋白原降解产物质控品。

2.根据权利要求1所述的纤维蛋白原降解产物质控品的制备方法，其特征在于：向步骤7制得的纤维蛋白原降解产物质控品中加入冻干保护液和防腐剂，依次通过第一预冻段、第二预冻段和预冻恒温段、第一干燥段、第二干燥段和第三干燥段的冻干处理，制成冻干的糖纤维蛋白原降解产物质控品，第一预冻段的温度为-5℃～-15℃，持续2-3小时，第二预冻段的温度为-15℃～-45℃，持续2-3小时，第三预冻段的温度为-42℃～-45℃，持续1-2小时，第一干燥段的温度为-45℃～-15℃，持续12-15小时，第二干燥段的温度为-15℃～-5℃，持续10-12小时，第三干燥段的温度为5℃～20℃，持续8-10小时。

3.根据权利要求2所述的纤维蛋白原降解产物质控品的制备方法，其特征在于：所述的冻干保护液中包含有甘露醇和牛血清白蛋白，甘露醇的质量浓度为0.5～3％，牛血清白蛋白的质量浓度为0.3～2％。

4.根据权利要求2所述的纤维蛋白原降解产物质控品的制备方法，其特征在于：所述的纤维蛋白原降解产物质控品与冻干保护液的体积比为1:(50～1500)。

5.根据权利要求1所述的纤维蛋白原降解产物质控品的制备方法，其特征在于：所述的冻干保护液中的冻干保护剂为海藻糖、蔗糖、聚乙烯吡咯烷酮或甘油中的任意一种或几种的组合，冻干保护剂在冻干保护液中的质量浓度为3～8％。

6.根据权利要求1所述的纤维蛋白原降解产物质控品的制备方法，其特征在于：步骤1中所述的缓冲盐为TBS缓冲液、磷酸盐缓冲液、4-羟乙基哌嗪乙磺酸或2-(N-吗啡啉)乙磺酸钠中的任意一种或几种的组合。

7.根据权利要求2所述的纤维蛋白原降解产物质控品的制备方法，其特征在于：所述的冻干保护液的pH值为6.8～7.4。

8.根据权利要求2所述的纤维蛋白原降解产物质控品的制备方法，其特征在于：所述的防腐剂为叠氮钠、苯甲酸钠、山梨酸钾或Procline 300、Procline 950中的任意一种或几种的组合。

9.一种权利要求1-8中任意一项的制备方法制成的纤维蛋白原降解产物质控品，其特征在于：纤维蛋白原降解产物质控品是利用前述的制备方法制备而成的。