[发明专利]一种粉虱类小型昆虫成虫显微注射方法

权利要求书

1.一种粉虱类小型昆虫成虫显微注射方法，所述粉虱类小型昆虫成虫显微注射采用玻璃微量注射针在显微平台进行注射，所述显微平台包括体视显微镜，气泵注射系统，显微操纵架，拉针仪，磨针仪，防震台，其特征为：所述粉虱类小型昆虫成虫显微注射包括以下步骤：

（1）制备玻璃微量注射针：所述玻璃微量注射针内径为4.5-5.5μm，所述玻璃微量注射针的针尖长度为5.5-6.5mm；

（2）注射前虫体麻醉：将待注射的虫体进行冰上麻醉；所述注射前虫体麻醉时间包括，烟粉虱麻醉时间为20-40分钟、温室白粉虱麻醉时间为50-70分钟、褐飞虱麻醉时间4-6分钟、灰飞虱麻醉时间10-15分钟；

（3）显微注射：将冰盒固定在显微镜底座移动平台上，将注射专用昆虫固定培养基平板放在冰盒上，把麻醉后的虫体摆放于注射专用昆虫固定培养基平板的V型槽内，进行显微注射；

所述注射专用昆虫固定培养基平板配方为4%的琼脂凝胶+0.04%复配着色剂；所述复配着色剂为天蓝色或果绿色任一种；所述注射专用昆虫固定培养基平板上设有一至三条V型槽，所述V型槽宽0.5-1mm，槽深0.5-1mm；

（4）注射后饲养：将注射后的虫体放入叶片饲养培养皿中饲养培养基的上面，用封口膜封口，放在光照培养箱内饲养10-14小时后，将叶片饲养培养皿倒置，使叶正面朝上，继续饲养；

所述叶片饲养培养皿的培养皿盖设有一个直径为2-4cm的孔洞，所述孔洞外覆盖100目纱网；所述饲养培养基配方为1.5%琼脂培养基+1%PBS溶液，所述饲养培养基上铺设有番茄、棉花或烟草任一种的幼嫩叶片，将叶片按叶背面朝上铺满培养皿并压实；将制作好的叶片饲养培养皿置于27℃光照培养箱中倒置12h后使用。

2.根据权利要求1所述的一种粉虱类小型昆虫成虫显微注射方法，其特征是：所述拉针仪参数为HEAT：265，FIL：3，VEL：30，DEL：225，PUL：150。

3.根据权利要求1所述的一种粉虱类小型昆虫成虫显微注射方法，其特征是：所述磨针仪的磨针角度45°。