[发明专利]葡糖鞘氨醇的检测方法

权利要求书

1.一种葡糖鞘氨醇的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

获取干血斑样本；

向所述干血斑样本中加入含有葡糖鞘氨醇同位素内标的乙腈水溶液，振荡即得待测样品；

采用液相色谱串联质谱法检测所述待测样品。

2.根据权利要求1所述的葡糖鞘氨醇的检测方法，其特征在于，所述乙腈水溶液中乙腈与水的体积比为50:(45～55)。

3.根据权利要求1所述的葡糖鞘氨醇的检测方法，其特征在于，所述液相色谱串联质谱法的液相色谱条件包括：色谱柱：C18柱，规格为2.1×50mm,1.7μm；流动相A：体积浓度为0.09％～0.11％的甲酸水溶液，流动相B：体积浓度为0.09％～0.11％的甲酸乙腈溶液；采用梯度洗脱。

4.根据权利要求3所述的葡糖鞘氨醇的检测方法，其特征在于，所述梯度洗脱包括如下程序：

0～2min：流动相B的体积百分比由45％上升至65％，流动相A的体积百分比由55％降低至35％；

2min～2.1min：流动相B的体积百分比由65％B上升至100％，流动相A的体积百分比由35％降低至0；

2.1min～4min：流动相B的体积百分比保持100％不变，流动相A的体积百分比保持0不变；

4min～4.1min：流动相B的体积百分比由100％降低至45％，流动相A的体积百分比由0上升至55％；

4.1min～5min：流动相B的体积百分比保持45％不变，流动相A的体积百分比保持55％不变。

5.根据权利要求1所述的葡糖鞘氨醇的检测方法，其特征在于，所述液相色谱串联质谱法的液相色谱条件还包括：流速：0.3mL/min～0.5mL/min；进样量：5μL～10μL；柱温：40℃～50℃。

6.根据权利要求1所述的葡糖鞘氨醇的检测方法，其特征在于，所述液相色谱串联质谱法的质谱条件包括：

离子源：电喷雾离子源，正离子模式；

毛细管电压：0.6KV～1.0KV；

锥孔电压：30V～40V；

碰撞电压：15V～30V；

离子源温度：145℃～155℃；

脱溶剂气温度：550℃～650℃；

脱溶剂气流量：800L/Hr～1000L/Hr；

锥孔气流量：45L/Hr～55L/Hr；

离子扫描模式：多重反应监测模式。

7.根据权利要求1所述的葡糖鞘氨醇的检测方法，其特征在于，所述乙腈水溶液中的葡糖鞘氨醇同位素内标为¹³C₆-葡糖鞘氨醇。

8.根据权利要求7所述的葡糖鞘氨醇的检测方法，其特征在于，所述液相色谱串联质谱法的质谱条件还包括：葡糖鞘氨醇的检测离子通道为462.3264.2和462.3282.2，其中462.3264.2为定量离子通道，462.3282.2为定性离子通道；¹³C₆-葡糖鞘氨醇的检测离子通道为468.3264.3和468.3282.3，其中468.3264.3为定量离子通道，468.3282.3为定性离子通道。

9.根据权利要求1所述的葡糖鞘氨醇的检测方法，其特征在于，所述干血斑样本的直径为3mm～3.5mm；所述乙腈水溶液的加入量为80μL～100μL。

10.根据权利要求1所述的葡糖鞘氨醇的检测方法，其特征在于，所述振荡的时间为20min～50min，速度为600rpm～700rpm。