[发明专利]一种谷氨酸浓度测定试剂

说明书

本发明提供了一种谷氨酸浓度测定试剂，涉及医学检验技术领域，该测定试剂包括试剂1和试剂2，其中，试剂1包括：Tris缓冲液、丙三醇、曲拉通‑100和NAD+；试剂2包括：Tris缓冲液、乙二醇、谷氨酸脱氢酶、二磷酸腺苷、曲拉通‑100、L‑亮氨酸和硫酸镁。该试剂是由试剂1和试剂2组成的双试剂，通过合理的选择和配比，具有操作简便、灵敏度高、准确度高、性能稳定等优点，适用于市场中绝大多数的全自动生化分析仪。

技术领域

本发明涉及医学检验技术领域，具体涉及一种谷氨酸浓度测定试剂。

背景技术

谷氨酸是一种常见的氨基酸，哺乳动物血液中的常见成分，对哺乳动物具有特殊生理作用的重要物质。谷氨酸大量存在于哺乳动物的脑组织中，作为重要的兴奋性神经递质，谷氨酸参与了中枢神经的一系列活动，是代谢过程中较为活跃的成分，人体血清参考范围为14-192μmol/L。人体中谷氨酸的浓度对癫痫、帕金森症、脑卒中、阿尔茨海默症等神经性疾病的诊断、病情进展以及治疗等具有指导性意义。目前，血清中谷氨酸浓度的测定主要有高效液相色谱法和分光光度法，其中，高效液相色谱法选择性好、灵敏度高，但设备投入大，检测成本高是其明显的缺点。而目前常规的分光光度法虽然设备投入小、检测成本低，但准确度和灵敏度较低，无法满足精准测定血清中谷氨酸浓度的要求。近年来，找寻一种成本低、投入小且准确度、灵敏度高的试剂盒或试剂成为目前谷氨酸浓度检测的新思路。

中国专利CN101082572公开了一种谷氨酸浓度的测定方法及谷氨酸诊断试剂盒，该试剂盒由缓冲液、稳定剂、辅酶和谷氨酸脱氢酶组成，稳定剂为硫酸铵、甘油、丙二醇、乙二醇中的至少一种，辅酶是NADP+、NAD+或thio-NAD+中的一种。该测定方法特异性高，不受内、外源物质的污染，测试结果精确、准确性好。中国专利CN101324571公开了一种利用酶比色法及酶联法技术的谷氨酸诊断/测定试剂盒，该试剂盒包括由缓冲液、稳定剂、辅酶、谷氨酸氧化酶、NAD(P)H氧化酶组成双剂试剂，其中，试剂1由缓冲液、稳定剂、辅酶组成；试剂2由缓冲液、稳定剂、谷氨酸氧化酶、NAD(P)H氧化酶组成。在该发明中的稳定剂为硫酸铵、甘油(Glycerol)、丙二醇、乙二醇及防腐剂中的至少一种。该试剂盒中的试剂不仅可以在紫外/可见光分析仪或半、全自动生化分析仪上进行谷氨酸浓度测定，而且测定速度快、准确度高，因而可以得到切实的推广应用。但上述两项专利中的试剂盒均仍存在线性范围相对较窄、灵敏度相对较低的问题。

针对谷氨酸浓度测定试剂存在的线性范围窄、灵敏度低的问题，亟需寻找一种试剂，使得该试剂灵敏度高、线性范围广的同时，能够保证操作简便且具备较高的准确度和稳定性，进而适用于市场中绝大多数的全自动生化分析仪，进而得到推广应用。

发明内容

本发明针对现有技术存在的问题，提供了一种谷氨酸浓度测定试剂。该试剂是由试剂1和试剂2组成的双试剂，具有操作简便、灵敏度高、准确度高、性能稳定等优点，适用于市场中绝大多数的全自动生化分析仪。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

本发明提供了一种谷氨酸浓度测定试剂，包括试剂1和试剂2，所述试剂1包括：Tris缓冲液、丙三醇、曲拉通-100和NAD+；所述试剂2包括：Tris缓冲液、乙二醇、谷氨酸脱氢酶、二磷酸腺苷、曲拉通-100、L-亮氨酸和硫酸镁。

进一步地，所述试剂1和试剂2的体积比为2-5:1。

优选地，所述试剂1和试剂2的体积比为4:1。

进一步地，所述试剂1包括：50-300mmol/L Tris缓冲液、50-300mmol/L丙三醇、0.1％-1％(v/v)曲拉通-100和2-6mmol/L NAD+。

进一步地，所述试剂2包括：50-300mmol/L Tris缓冲液、50-300mmol/L乙二醇、5-10KU/L谷氨酸脱氢酶、0.1-1mmol/L二磷酸腺苷、0.1％-1％(v/v)曲拉通-100、1-10mmol/L的L-亮氨酸和5-50mmol/L硫酸镁。