[发明专利]氯丙那林半抗原和人工抗原及其制备方法与应用

权利要求书

1.氯丙那林半抗原，其特征在于，其结构式为如下式(I)、式(II)和式(III)中的一种：

2.权利要求1所述氯丙那林半抗原的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、2-氯苯甲醛发生加成环化反应制备化合物2；

S2、化合物2与邻苯二甲酸亚胺反应得到化合物4；

S3、化合物4反应制备化合物5；

S4、化合物5和化合物6反应得到化合物7；

S5、化合物7发生酯基水解反应得到所述氯丙那林半抗原；

其中：

所述化合物2、化合物4和化合物5的结构式分别如下：

所述化合物6的结构式为

中的一种；

所述化合物7的结构式为

中的一种。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、将碘化三甲基磺铵溶于二甲基亚砜和四氢呋喃的混合物中，加入NaH后室温搅拌，再将2-氯苯甲醛逐滴加入后室温搅拌，加水后用乙酸乙酯萃取，依次用水和饱和NaCl水溶液冲洗后，再用无水Na₂SO4脱水，并在减压条件下将溶剂完全蒸发得到化合物2；

S2、将化合物2、邻苯二甲酸亚胺和吡啶在叔丁醇中加热回流6h，随后抽真空除去溶剂得到残渣，再向残渣中加入二氯甲烷，依次用水和0.5mol/L的HCl溶液冲洗后，再用无水Na₂SO4脱水，最后去除溶剂后净化得到化合物4；

S3、将化合物4与水合肼在乙醇中室温搅拌混合12h，过滤后将滤液经减压浓缩直至干燥，层析得到化合物5；

S4、将化合物5溶于二氯甲烷中，加入化合物6，在30℃下搅拌15min后加入乙酸，并在30min内分3次加入NaBH(OAc)₃，在30℃下搅拌3h后，倒入NaHCO₃溶液中，搅拌至没有气体产生，分离有机层后，用二氯甲烷提取水层，用无水Na₂SO4干燥合成的有机层，去除溶剂后层析纯化，得到化合物7；

S5、将化合物7溶于NaOH溶液并回流加热5h，冷却至常温后，加入0.5mol/L的HCl溶液将pH值调节为7.0，浓缩后得到残留物，用体积比3：1的二氯甲烷和甲醇的混合物提取残留物后过滤，将得到的有机层在真空中浓缩得到所述氯丙那林半抗原。

4.氯丙那林人工抗原，其特征在于，由权利要求1所述氯丙那林半抗原与载体蛋白偶联后得到；

其中，所述载体蛋白选自牛血清白蛋白、卵清蛋白、钥孔血蓝蛋白、甲状腺蛋白、人血清白蛋白。

5.权利要求4所述氯丙那林人工抗原的制备方法，其特征在于，采用碳二亚胺或混合酸酐法将所述氯丙那林半抗原与载体蛋白偶联制得氯丙那林人工抗原。

6.由权利要求4所述氯丙那林人工抗原制备的特异性抗体，其特征在于，包括多克隆抗体和单克隆抗体。

7.权利要求1所述氯丙那林半抗原或权利要求4所述氯丙那林人工抗原的以下任一应用：

①在制备抗氯丙那林特异性抗体中的应用；

②在检测抗氯丙那林特异性抗体中的应用。

8.抗氯丙那林多克隆抗体，其特征在于，由权利要求4所述氯丙那林人工抗原免疫实验动物获得；

优选地，所述氯丙那林人工抗原由所述氯丙那林半抗原与钥孔血蓝蛋白偶联得到。

9.由权利要求6所述特异性抗体或权利要求8所述多克隆抗体制备的氯丙那林检测试剂或试剂盒。

10.权利要求6所述特异性抗体或权利要求8所述多克隆抗体的以下任一应用：

(1)在检测氯丙那林及其同类药物中的应用；

(2)在制备氯丙那林及其同类药物的免疫层析试纸条中的应用；

(3)在制备氯丙那林及其同类药物的胶体金检测试纸条中的应用；

优选地，所述氯丙那林及其同类药物选自莱克多巴胺、克伦特罗、沙丁胺醇、溴布特罗、特布他林、西马特罗、氯丙那林、妥布特罗、西布特罗、马布特罗、克伦普罗、班布特罗、齐帕特罗、克伦巴胺、马喷特罗。