[发明专利]一种两段式低氮低磷胁迫微藻培养方法在审
| 申请号： | 202010160532.7 | 申请日： | 2020-03-10 |
| 公开（公告）号： | CN111172039A | 公开（公告）日： | 2020-05-19 |
| 发明（设计）人： | 高翔;周维成;张弛;王尧尧;王高鸿;李登峰 | 申请（专利权）人： | 宁波大学 |
| 主分类号： | C12N1/12 | 分类号： | C12N1/12;C12N1/38;C12R1/89 |
| 代理公司： | 长沙智德知识产权代理事务所(普通合伙) 43207 | 代理人： | 段芳萼 |
| 地址： | 315211 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 段式 低氮低磷 胁迫 培养 方法 | ||
1.一种两段式低氮低磷胁迫微藻细胞培养方法，其特征在于包括如下步骤：
(1)在最适培养条件下培养获得对数期微藻细胞预培养液；
(2)离心对数期微藻细胞预培养液，收集得到薇藻细胞；
(3)将收集得到的薇藻细胞重新放大培养于低氮、低磷胁迫培养基中；
(4)25℃光照通气培养10-14d。
2.根据权利要求1所述的种两段式低氮低磷胁迫微藻细胞培养方法，其特征在于：步骤(1)最适培养条件为光照强度为100μmol/(m2·s)、温度为25℃。预培养获得的对数期微藻细胞培养液为使用衣藻、小球藻、三角褐指藻作为藻种进行起始接种后，培养养至藻细胞浓度为1.0x 106个/L—1.2x 106个/L范围内的微藻细胞培养液。
3.根据权利要求1所述的种两段式低氮低磷胁迫微藻细胞培养方法，其特征在于：步骤(2)离心收集时离心机转速为2000-5000rpm，离心时间为3-5min。
4.根据权利要求1所述的一种两段式微藻培养方法，其特征在于：步骤(3)用于放大培养的低氮低磷胁迫培养基是以TAP和BG11培养基配方为基础优化的。优化后的1X培养液中总氮(以N计)浓度小于0.200mg/L，总磷浓度小于0.010mg/L，其它成分不变。当使用衣藻、小球藻、三角褐指藻作为藻种进行放大培养时，所采用的培养基分别为优化后的低氮低磷胁迫TAP培养基、低氮低磷胁迫BG11、低氮低磷胁迫BG11。
5.根据权利要求1所述的一种两段式低氮低磷胁迫微藻细胞培养方法，其特征在于：步骤(4)25℃光照通气培养的光照强度为100μmol/(m2·s)，通入的气体为无菌空气。培养时间依据微藻藻种不同而不同。采用衣藻、小球藻、三角褐指藻作藻种时，培养时间分别为10天、12天和14天。
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