[发明专利]藻蓝蛋白-二氢卟酚e6共价纳米颗粒的制备及其应用

权利要求书

1.藻蓝蛋白-二氢卟酚e6共价纳米颗粒的制备方法，其特征在于，具体操作步骤如下：

（1）活化二氢卟酚e6

称取一定量的Ce6、N-羟基琥珀酰亚胺、1-乙基-3-(3-二甲基丙胺)碳二亚胺加入到DMSO溶液中，超声使其充分溶解，于常温避光搅拌活化一段时间，得到Ce6衍生物；

（2）配制藻蓝蛋白溶液

按照Ce6:藻蓝蛋白不同摩尔比的分别称取若干藻蓝蛋白溶解于PBS中，超声使其充分溶解，离心，取上清液测电子吸收光谱，定量藻蓝蛋白的浓度；

（3）制备藻蓝蛋白-二氢卟酚e6溶液；

取出活化的Ce6衍生物，加到搅拌中的藻蓝蛋白溶液中，反应过夜；

（4）制备藻蓝蛋白-二氢卟酚e6粉末；

取出反应后溶液，离心，取上清液在水中透析，除去游离的Ce6、N-羟基琥珀酰亚胺、1-乙基-3-(3-二甲基丙胺)碳二亚胺，取透析后的溶液冷冻，冻干，得到复合物粉末，于-20℃保存。

2.根据权利要求1所述的藻蓝蛋白-二氢卟酚e6共价纳米颗粒的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中N-羟基琥珀酰亚胺、1-乙基-3-(3-二甲基丙胺)碳二亚胺、Ce6的摩尔比为5:5:1；所述DMSO加入量为500 μL 。

3.根据权利要求1所述的藻蓝蛋白-二氢卟酚e6共价纳米颗粒的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中的于常温避光搅拌活化一段时间是指于常温避光搅拌活化1h，得到其衍生物。

4.根据权利要求藻蓝蛋白-二氢卟酚e6共价纳米颗粒的制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中的Ce6:藻蓝蛋白摩尔比为5:1、10:1、20:1中的任意一种，PBS用量为5 mL。

5.根据权利要求藻蓝蛋白-二氢卟酚e6共价纳米颗粒的制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中的定量藻蓝蛋白浓度，是指在10000转离心三分钟，取上清液测电子吸收光谱，定量藻蓝蛋白的浓度为20 μM。

6.根据权利要求1所述的藻蓝蛋白-二氢卟酚e6共价纳米颗粒的制备方法，其特征在于：所述步骤（3）中反应过夜是指取出活化的Ce6衍生物，缓慢滴加到搅拌中的藻蓝蛋白溶液中，于4℃条件下反应24h。

7.根据权利要求1所述的的藻蓝蛋白-二氢卟酚e6共价纳米颗粒的制备方法，其特征在于：所述步骤（4）中的取出反应后溶液，离心，取上清液在水中透析是指24h后，取出反应后溶液，10000转离心三分钟，取上清液在水中透析3天,截留分子量为3500Da。

8.一种如权利要求1~7任一项所述制备方法获得的藻蓝蛋白-二氢卟酚e6共价纳米颗粒在用于制备肿瘤光动力治疗试剂材料和光动力药物上的应用。

9.一种如权利要求1~7任一项所述制备方法获得的藻蓝蛋白-二氢卟酚e6共价纳米颗粒在组建肿瘤光动力治疗的系统上的应用，其特征在于：所述系统包括藻蓝蛋白-二氢卟酚e6共价纳米颗粒的试剂材料，激光光源。

10.根据权利要9所述的应用，其特征在于：所述激光光源为提供光敏剂激发波长的光源，激光光源的激发光波长为600-820nm，能量密度范围为0.05-0.5W/cm²。