[发明专利]人TPT1/TCTP基因在制备抗肿瘤药物中的应用

说明书

本发明人TPT1/TCTP基因在制备抗肿瘤药物中的应用，属于生物技术领域。本发明构建了人TPT1/TCTP基因小分子干扰RNA、人TPT1/TCTP基因干扰核酸构建体、人TPT1/TCTP基因干扰慢病毒并公开了他们的用途。本发明提供的siRNA或者包含该siRNA序列的核酸构建体、慢病毒能够特异性抑制人TPT1/TCTP基因的表达，尤其是慢病毒，能够高效侵染靶细胞，高效率地抑制靶细胞中TPT1/TCTP基因的表达，进而抑制肿瘤细胞的生长，促进肿瘤细胞凋亡，在肿瘤治疗中具有重要意义。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及人TPT1/TCTP基因在制备抗肿瘤药物中的应用。

背景技术

肿瘤翻译控制蛋白（TPT1或TCTP）是一个生长相关的蛋白质，有促进生长、抗凋亡的作用，阻断该蛋白表达能抑制肿瘤细胞株的恶性表型。TPT1/TCTP基因与其他甲状腺癌、胸腺瘤之间的关联尚无相关报道。现有技术中使用方法类似基因构建了人基因小分子干扰RNA、人基因干扰核酸构建体、人基因干扰慢病毒并公开了它们的用途。提供siRNA或者包含该siRNA序列的核酸构建体、慢病毒能够特异性抑制人基因的表达，尤其是慢病毒，能够高效侵染靶细胞，高效率地抑制靶细胞中基因的表达，进而抑制肿瘤细胞的生长，促进肿瘤细胞凋亡，在肿瘤治疗中具有重要意义。

本发明深入研究TPT1/TCTP基因在肿瘤发生中的调节功能，甲状腺癌、胸腺瘤细胞模型，以RNAi为手段研究TPT1/TCTP在甲状腺癌、胸腺瘤发生和发展中的作用。核糖核酸干扰(RNA interference，RNAi)作为一种基因沉默技术，可高效、特异地阻断体内特定基因的表达，从而引起生物体内特异基因的沉默，使细胞表现出某种基因表型的缺失。目前，该技术在基因功能研究、肿瘤的基因治疗及新药的研发等方面已经显示出广阔前景。

发明内容

本发明的目的在于提供人TPT1/TCTP基因在制备抗肿瘤药物中的应用。

为实现上述目的采用以下技术方案：

本发明以RNA干扰为手段，研究了TPT1/TCTP基因在肿瘤发生和发展中的作用，公开了一种抑制或降低肿瘤细胞生长、增殖、分化和/或存活的方法，该方法包括：向肿瘤细胞施用一种能够特异性抑制TPT1/TCTP基因的转录或翻译，或能够特异性抑制TPT1/TCTP蛋白的表达或活性的分子，以此来抑制肿瘤细胞的生长、增殖、分化和/或存活。所述肿瘤细胞选自甲状腺癌、胸腺瘤之任一。

从Genbank中调取人TPT1/TCTP基因序列；预测多个siRNA位点；合成针对TPT1/TCTP基因的有效的siRNA序列，两端含酶切位点粘端的双链DNA Oligo；慢病毒载体双酶切后与双链DNA Oligo连接，构建表达TPT1/TCTP基因siRNA序列的RNAi质粒；将RNAi质粒和慢病毒包装需要的辅助载体共转染人胚肾细胞293T，产生重组慢病毒颗粒，选取胸腺瘤和甲状腺癌细胞系，慢病毒进行侵染，qpcr检测TPT1/TCTP基因的沉默效率，筛选高效沉默TPT1/TCTP基因的慢病毒。MTT法检测TPT1/TCTP沉默后胸腺瘤和甲状腺癌细胞的增殖能力。

本发明的优点在于：

本发明公开了人TPT1/TCTP基因的用途及其相关药物。还公开了人 TPT1/TCTP基因在肿瘤治疗、肿瘤诊断及药物制备中的用途。本发明还进一步构建了人TPT1/TCTP基因小分子干扰 RNA、人TPT1/TCTP基因干扰核酸构建体、人TPT1/TCTP 基因干扰慢病毒并公开了他们的用途。本发明提供的 siRNA 或者包含该siRNA 序列的核酸构建体、慢病毒能够特异性抑制人TPT1/TCTP基因的表达，尤其是慢病毒，能够高效侵染靶细胞，高效率地抑制靶细胞中TPT1/TCTP基因的表达，进而抑制肿瘤细胞的生长，促进肿瘤细胞凋亡，在肿瘤治疗中具有重要意义。

附图说明

图1人甲状腺癌细胞FTC-133细胞TPT1/TCTP基因干扰效率鉴定。