[发明专利]一种编码甲状旁腺素蛋白或其片段的核酸分子

说明书

本发明涉及一种核酸分子，其包含编码甲状旁腺素(PTH)蛋白或其片段的核苷酸序列和编码终止区。本申请还涉及包含所述核酸分子的载体和宿主细胞。本申请还涉及含有所述核酸分子的药物组合物，以及所述药物组合物的用途。

技术领域

本申请涉及一种核酸分子，其包含编码甲状旁腺素(PTH)蛋白或其片段的核苷酸序列和编码终止区。本申请还涉及包含所述核酸分子的载体和宿主细胞。本申请还涉及含有所述核酸分子的药物组合物，以及所述药物组合物的用途。

背景技术

骨质疏松症(osteoporosis，OP)常见于老年人与绝经后的妇女。表现为骨质脆性增加，并容易发生骨折。原因是体内的骨量降低和骨组织微结构遭到破坏。骨质疏松症在各个年龄均可发病，可分为原发性、继发性和特发性骨质疏松症。目前，骨质疏松症的治疗药物主要从两方面入手，一种促进骨钙形成，另外一种抑制骨的吸收。促进骨钙形成的药物主要有钙制剂及维生素D类药物。而抑制骨吸收的药物主要有雌激素、孕激素、雌激素受体调节剂、降钙素、双磷酸盐和唾嗓类药物等。这些药物防治效果不尽理想，并且伴随副作用或不能长期使用。研究表明，甲状旁腺激素可以促进骨形成，明显减轻骨质疏松患者的患病情况，降低骨质疏松症患者的骨折发生率，使患者全身骨密度获得增加。

甲状旁腺素(Parathyroid hormone,PTH)是由甲状旁腺主细胞分泌的含84个氨基酸残基的直链多肽。人甲状旁腺激素可调节钙、磷代谢及骨转换，降血压，调节维生素D受体表达，促进维生素代谢，调节碱性磷酸酯酶的活性。天然甲状旁腺素含84个氨基酸(在本文中也简称PTH(1-84aa))。已报道，PTH的N端片段(即，PTH蛋白的第1-34个氨基酸，简称PTH(1-34aa))也具有全长蛋白的生物学活性。当前，PTH(1-34aa)和PTH(1-84aa)均有上市品种。然而，由于PTH不含半胱氨酸，PTH(1-34aa)和PTH(1-84aa)在体内很不稳定，且其分子量小，易被肾小球滤过，因而在体内的半衰期较短。为了达到治疗效果，一般需要频繁大剂量用药(通常每天皮下注射一次，连续几个月)，但如此频繁的用药方式再加上较长的治疗周期使得病人较难承受，并且在临床上会造成头疼、呕吐、发烧等不良反应，病人的顺应性差。因此，需要开发新的PTH药剂。

发明内容

为了解决上述问题，本申请的发明人经过大量实验，开发了一种编码甲状旁腺素蛋白或其片段的核酸分子，其能够显著提高甲状旁腺素(PTH)蛋白或其片段在细胞内或体内的表达水平。由此，本申请提供了一种编码甲状旁腺素(PTH)蛋白或其片段的核酸分子，还提供了包含该核酸分子的重组载体、宿主细胞及药物组合物，并由此提高了患者用药的顺从性，降低了治疗成本。

因此，在本申请的第一方面，提供了一种核酸分子，其包含编码甲状旁腺素(PTH)蛋白或其片段的核苷酸序列，以及，编码终止区；所述编码终止区的5’端连接于所述编码PTH蛋白或其片段的核苷酸序列的3’端；其中，所述编码终止区包含或由至少两个终止密码子组成，并且所述编码终止区的前两个终止密码子为TGATAG(SEQ ID NO:18)。

在某些优选的实施方案中，所述编码终止区的5’端直接连接于所述编码PTH蛋白或其片段的核苷酸序列的3’端。在某些优选的实施方案中，所述编码终止区的5’端通过核苷酸接头连接于所述编码PTH蛋白或其片段的核苷酸序列的3’端，并且，所述核苷酸接头不改变所述编码终止区的开放阅读框。如本领域技术人员所通常理解的，在蛋白质的翻译过程中，从起始密码子开始，核酸链上每三个连续核苷酸即构成一个密码子，并且对应于一种氨基酸或终止密码子。因此，在本申请中，表述“所述核苷酸接头不改变所述编码终止区的开放阅读框”是指，所述核苷酸接头的长度是3n个核苷酸，n为大于或等于0的整数，由此，所述编码终止区的阅读框不会发生改变，其与编码PTH蛋白或其片段的核苷酸序列仍然是符合读框的。在某些优选的实施方案中，所述核苷酸接头的长度是3n个核苷酸，n为整数且0≤n≤9；例如，n为0，1，2，3，4，5，6，7，8，或9。

在某些优选的实施方案中，所述甲状旁腺素蛋白为人甲状旁腺素蛋白。