[发明专利]一种酶法制备甘油单酯型n-3PUFA的方法有效
申请号: | 202010167898.7 | 申请日: | 2020-03-11 |
公开(公告)号: | CN111172209B | 公开(公告)日: | 2021-08-10 |
发明(设计)人: | 李道明;刘看看;刘宁;崔俊杰 | 申请(专利权)人: | 陕西科技大学 |
主分类号: | C12P7/64 | 分类号: | C12P7/64 |
代理公司: | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 | 代理人: | 张海平 |
地址: | 710021*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 法制 甘油 单酯型 pufa 方法 | ||
1.一种酶法制备甘油单酯型n-3PUFA的方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1:在有机溶剂中,采用固定化甘油三酯脂肪酶催化含n-3PUFA的油脂进行甘油解反应,反应结束后,回收有机溶剂并离心收集上层油相;固定化甘油三酯脂肪酶为Novozym435或Lipozyme 435;有机溶剂为叔丁醇或叔戊醇;
步骤2:向步骤1得到的上层油相中加入缓冲液和甘油单酯脂肪酶选择性催化甘油单酯进行适度水解反应,反应结束后,离心收集上层油相;甘油单酯脂肪酶为MGLP II;
步骤3:将步骤2得到的上层油相进行分子蒸馏纯化,收集馏出物,得到甘油单酯型n-3PUFA。
2.根据权利要求1所述的酶法制备甘油单酯型n-3PUFA的方法,其特征在于,步骤1中,固定化甘油三酯脂肪酶的添加量为底物油总质量的5~10%,甘油与含n-3PUFA的油脂的摩尔比为5:1,有机溶剂的添加量为底物总质量的2~3倍量mL/g。
3.根据权利要求1所述的酶法制备甘油单酯型n-3PUFA的方法,其特征在于,步骤1中的反应,是在40~60℃的反应温度、300~500rpm的搅拌速度下反应2~6h。
4.根据权利要求1所述的酶法制备甘油单酯型n-3PUFA的方法,其特征在于,步骤2中,甘油单酯脂肪酶的用量为200~300U/g底物质量。
5.根据权利要求1所述的酶法制备甘油单酯型n-3PUFA的方法,其特征在于,步骤2中,缓冲液为pH=9.0的Tris-HCl缓冲液,缓冲液加入量为步骤1得到的上层油相质量的30~100wt%。
6.根据权利要求1所述的酶法制备甘油单酯型n-3PUFA的方法,其特征在于,步骤2中,反应温度为40~60℃,反应时间为0.5~2h。
7.根据权利要求1所述的酶法制备甘油单酯型n-3PUFA的方法,其特征在于,步骤3中,分子蒸馏纯化的反应条件为:进料温度60℃,进料速度1~2mL/min,冷凝温度35~40℃,一级蒸发面温度110℃,二级蒸发面温度160℃,刮膜电机转速250~270rpm。
8.根据权利要求1所述的酶法制备甘油单酯型n-3PUFA的方法,其特征在于,步骤3中,一级分子蒸馏的操作压强≤20Pa,二级分子蒸馏的操作压强≤5Pa。
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