[发明专利]复方氨基酸注射液含量测定方法

说明书

本发明属于氨基酸分析检测领域，公开了一种复方氨基酸注射液含量测定方法，包括配液、分离测定、计算等步骤，通过一次性进样分离测定含有色氨酸的复方氨基酸注射液中的氨基酸各组分的含量。本发明减少了氨基酸含量测定过程中操作步骤，解决了需要重复进样测定氨基酸含量的问题。本发明的方法操作简便、肉眼可见、快速、精密度高、准确度高、重复性好、成本低，能够实现对样品的直接检测，大大减少了分析时间，适于工业快速分析。本发明的方法适用于测定复方氨基酸注射液中氨基酸各组分的含量。

技术领域

本发明属于氨基酸分析检测领域，涉及一种复方氨基酸注射液分析检测，具体地说涉及一种复方氨基酸注射液含量测定方法。

背景技术

氨基酸是蛋白质的基本结构单位和生物代谢过程中的重要物质，复方氨基酸现已广泛地应用于医药行业。而氨基酸分析技术对复方氨基酸药品具有重要意义。其分析测定方法，按照检测方法可分为化学分析法、电化学分析法、分光光度法、氨基酸分离分析方法等。其中氨基酸分离分析方法按照衍生反应的先后，又分为柱前衍生和柱后衍生。

上述分析方法中，化学分析法、电化学分析法以及分光光度法的专属性差，不能实现多种氨基酸同时分离测定；

柱前衍生法，虽然可以使用自动进样器与色谱联用实现多种氨基酸的分离测定，但是衍生技术较为复杂，周期较长，衍生条件不易控制，重复性较差，难以推广；

柱后衍生法中比较准确的定量方法是离子交换色谱法，其中，较为普遍使用的有氨基酸分析仪和高效液相色谱；

高效液相色谱衍生技术较为复杂，周期较长，衍生条件不易控制，重复性较差，难以推广；

氨基酸分析仪虽然灵敏快速提供数据准确可靠、分辨率高操作简单分析周期短、体系稳定，但对于复方氨基酸注射液，需要重复进样测定氨基酸含量。

发明内容

本发明的目的，是要提供一种复方氨基酸注射液含量测定方法，以解决现有技术所存在的需要重复进样测定氨基酸含量的问题。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案是：

一种复方氨基酸注射液含量测定方法，包括依次进行的以下步骤：

1)配液：

配制含有色氨酸的复方氨基酸标准液，得标准液；

稀释含有色氨酸的复方氨基酸注射液，得待测液；

2)分离测定：

分别取标准液或待测液进样于氨基酸分析仪进行分离测定，得到相应的标准液峰面积或相应的待测液峰面积；

3)计算：

按外标法代入标准液峰面积和待测液峰面积计算待测液中的氨基酸各组分的含量。

作为本发明的一种限定，步骤2)中，进样前在氨基酸分析仪内加入活化后的衍生液R；分离后的氨基酸各组分分别与衍生液R发生衍生化反应；

分别将标准液或待测液进样于氨基酸分析仪，随运行时间变化采用不同的流动相与衍生液R配合洗脱分离相应的标准液或相应的待测液中的氨基酸各组分，再分别经A通道或B通道测定相应的标准液或待测液中氨基酸各组分的峰面积；

其中，流动相是以三水合乙醇钠、乙醇、甲酸、乙酸、三氟乙酸、氢氧化钠、硼酸、EDTA二钠盐、辛酸、超纯水中的至少两种制成多种比例而得到；

氨基酸分析仪采用氨基酸阳离子分离柱；柱温随洗脱分离时间变化而变化。

作为本发明的进一步限定，氨基酸分析仪的进样量为20μL或40μL，流速为180-260μL/min；

A通道检测的波长为570nm，A通道检测脯氨酸之外的氨基酸各组分；