[发明专利]一种氨基酸类冷冻保存液在器官和组织冻存中的应用有效
申请号: | 202010171845.2 | 申请日: | 2020-03-12 |
公开(公告)号: | CN111789107B | 公开(公告)日: | 2022-11-11 |
发明(设计)人: | 严杰;乔杰;闫丽盈;李蓉;王健君;金晟琳 | 申请(专利权)人: | 北京大学第三医院(北京大学第三临床医学院);中国科学院化学研究所 |
主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02 |
代理公司: | 北京知元同创知识产权代理事务所(普通合伙) 11535 | 代理人: | 黄越;焦健 |
地址: | 100191 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 氨基酸 冷冻 保存 器官 组织 中的 应用 | ||
1.一种氨基酸类冷冻保存液在器官和/或组织冷冻保存中的应用,其特征在于,每100mL所述氨基酸类冷冻保存液中含有:氨基酸类仿生控冰材料0.1-50g,多元醇5.0-45mL,DMSO0-15mL,血清或人血清白蛋白或牛血清白蛋白0-30mL,水溶性糖0.1-1molL-1,缓冲液余量;
所述氨基酸类仿生控冰材料为聚-L-脯氨酸、聚-L-精氨酸中的一种或两种组合,所述聚-L-脯氨酸和聚-L-精氨酸的聚合度为8~15。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述多元醇为碳原子数为2-5的多元醇。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述多元醇为乙二醇,丙二醇,丙三醇中的任一种。
4.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述水溶性糖为非还原性双糖、水溶性多糖、糖酐中的至少一种。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述水溶性糖选自蔗糖、海藻糖、水溶性纤维素、聚蔗糖。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述水溶性糖为羟丙基甲基纤维素。
7.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述缓冲液选自DPBS或hepes-bufferedHTF缓冲液或其他细胞培养基缓冲液中的至少一种。
8.根据权利要求1-7任一项所述的应用,其特征在于,每100mL冷冻保存液中所述DMSO含量为1.0-10mL。
9.根据权利要求1-7任一项所述的应用,其特征在于,每100mL冷冻保存液中所述血清或人血清白蛋白或牛血清白蛋白含量为10-15mL。
10.根据权利要求1-7任一项所述的应用,其特征在于,每100mL冷冻保存液中所述水溶性糖含量为0.1-0.8molL-1。
11.根据权利要求1-7任一项所述的应用,其特征在于,每100mL冷冻保存液中所述多元醇含量为5.0-40mL。
12.根据权利要求1-7任一项所述的应用,其特征在于,所述冷冻保存液的pH为6.5-7.6。
13.根据权利要求1-7任一项所述的应用,其特征在于,每100mL所述冷冻保存液还含有0.1-6.0g的聚乙烯醇PVA。
14.根据权利要求1-7任一项所述的应用,所述冷冻保存液的制备方法包括如下步骤:
(1)将所述氨基酸类仿生控冰材料溶解于部分缓冲液,调节pH后形成溶液1;
(2)将水溶性糖溶解于部分缓冲液中,待水溶性糖全部溶解后加入其他组分,制得溶液3;
(3)待溶液1和溶液3冷却至室温后混合,调节pH并用缓冲液定容至预定体积,得到所述冷冻保存液。
15.根据权利要求14所述的应用,其特征在于,步骤(2)之前还包括任选地,将PVA溶解于部分缓冲液中,调节pH后得到溶液2的步骤。
16.根据权利要求15所述的应用,其特征在于,步骤(3)包括:待溶液1、任选地溶液2、和溶液3冷却至室温后混合,调节pH并用缓冲液定容至预定体积,得到所述冷冻保存液。
17.根据权利要求14所述的应用,其特征在于,当所述冷冻保存液含有血清或人血清白蛋白或牛血清白蛋白时,所述血清或人血清白蛋白或牛血清白蛋白在所述冷冻保存液使用时添加。
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