[发明专利]一种用于定量测定PSMA关键中间体手性异构体的方法

说明书

本发明提供了一种用于定量测定PSMA关键中间体手性异构体的方法，该方法为反相高效液相色谱法，其色谱条件为采用多糖涂覆型反相手性柱，所述手性柱为CHIRALCEL OD‑R，以水：乙腈：三氟乙酸＝50：50:0.1为稀释液，手性柱的柱温是30℃，以A相:0.1％三氟乙酸水溶液B相:0.1％三氟乙酸乙腈溶液为流动相，流动相的流速为1.0mL/min，液相色谱检测波长为220nm。本发明的有益效果体现在：本发明的方法可以高效准确的实现PSMA关键中间体手性异构体的分离测定，且快速准确地分析出的PSMA关键中间体的手性异构体，峰形较好，分离度符合规定，从而有效地控制PSMA关键中间体的质量，本发明方法分离度高、专属性好，灵敏度强、操作简便。

技术领域

本发明属于化学医药技术领域，具体涉及一种用于定量测定PSMA关键中间体手性异构体的方法。

背景技术

前列腺特异性膜抗原(PSMA)是一种II型细胞表面膜结合糖蛋白，其分子量约110kD，包括一个细胞内片段(氨基酸序列1-18)，一个跨膜域(氨基酸序列19-43)，和一个细胞外域(氨基酸序列44-750)。细胞内片段和跨膜域现在被认为是没有显著作用的，而细胞外域参与多种特殊的活性作用。PSMA在神经系统起到了很重要的作用，它促进N-乙酰天门冬谷酰胺(NAAG)的代谢并生成谷氨酸和N-乙酰天门冬氨酸。相应的，它有时也和N-乙酰基α连接的酸性二肽酶(NAALADase)有关。PSMA也和叶酸水解酶I(FOLH1)或谷氨酸羧肽酶(GCPII)有关，这是因为PSMA在小肠近端可以从聚-γ-谷氨酸化的叶酸上移除γ连接的谷氨酸，也可从多肽和小分子上移除α连接的谷氨酸。

PSMA实际已经作为许多药物的靶向目标。式1是由一个PSMA配体和tubulysin偶联得到的化合物。该化合物利用PSMA配体将活性药物tubulysin导向PSMA高表达的细胞中。

化合物(式2)是合成式1的关键中间体，其化学名为2-(4-((9S,13S)-9,13-Bis(Tert-Butoxycarbonyl)-18,18-Dimethyl-3,11,16-Trioxo-17-Oxa-2,4,10,12-Tetraazanonadecyl)Phenyl)Acetic Acid。CAS号为1610413-97-2；分子式为C₃₄H₅₄N₄O₁₀；结构式如下：

采用常规的手性柱和常规流动相的高效液相色谱法的分析方法难以将化合物(式2)手性异构体有效分离、峰形较差、柱效很低。手性异构体在一般的高效液相色谱法中很难得到有效分离，必须采用合适的检测方法才能达到分析分离的目的。

为了保证化合物(式2)中间体有较高的光学纯度，有必要找到一种能简单高效的将化合物(式2)手性异构体分离的高效液相色谱测定方法，对于实现化合物(式2)手性异构体的分离在化合物(式2)的合成和质量控制中具有重要意义。

发明内容

为了解决现有技术的不足，本发明提供了一种用于定量测定PSMA关键中间体手性异构体的方法，从而高效准确的实现该中间体手性异构体的分离测定。

本发明的目的通过以下技术方案来实现：

一种用于定量测定PSMA关键中间体手性异构体的方法，其特征在于：所述PSMA关键中间体结构式如下所示：

，所述测定方法为反相高效液相色谱法。

包括如下步骤：将样品稀释配置成检测溶液，按照以下色谱条件进行HPLC检测，所述液相色谱的色谱条件：采用多糖涂覆型反相手性柱，以A相：0.1％酸溶液，B相：0.1％酸乙腈溶液为流动相并进行梯度洗脱；