[发明专利]含人体细胞衍生的细胞膜外囊泡的雾化吸入制剂、制法及其应用

权利要求书

1.一种药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物含有(a)人的体细胞衍生的活性物质,所述的活性物质为人的体细胞所产生的细胞膜外囊泡；和(b)药学上可接受的载体。

2.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述的体细胞选自下组：人体组织、骨髓和/或血液来源的干细胞、祖细胞、免疫细胞、或其组合。

3.如权利要求1-2中任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物的剂型选自下组：雾化吸入剂、滴眼液、滴鼻液。

4.如权利要求1-3中任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物具有以下特性：

(P1)优于活细胞制剂的保存稳定性；优选地，所述的保存包括在常温和/或低温下(如-196℃至25℃，较佳地-100℃至0℃)进行保存；所述的“优于活细胞制剂的保存稳定性”指所述的药物组合物的稳定性优于相同条件下含活细胞制剂的稳定性；和

(P2)高分散性；较佳地，当所述药物组合物为含水的液态制剂时(如以生理盐水配制的溶液时)，在0-25℃放置6-24小时，呈现无色透明，且无肉眼可见的絮状物和沉淀物。

5.如权利要求1-4中任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物被施用于选自下组的部位：眼球结膜、眼睑结膜、视网膜、口腔、鼻腔、上呼吸道、下呼吸道、胃肠道、肺部、或其组合。

6.如权利要求1-5中任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述的细胞膜外囊泡的直径优选为50-500nm。

7.一种制备细胞膜外囊泡的方法，其特征在于，包括步骤：

(S1)培养人的体细胞，使其达到预定的汇合度(如75-90％)；

(S2)在适合产生EV的条件下，继续培养所述的细胞一段时间T1；

(S3)从培养体系中去除细胞，从而分离获得含细胞膜外囊泡的培养液，即为“条件培养液(conditioned medium)”；

(S4)将所述的条件培养液与聚乙二醇(PEG)进行混合，形成第一混合物，并放置一段时间T2，从而形成经PEG修饰的细胞膜外囊泡；其中，所述的T2通常为6-60小时，较佳地12-48小时；

(S5)对上一步骤的第一混合物进行离心，使得所述的经PEG修饰的细胞膜外囊泡沉淀，并弃去上清，获得经PEG修饰的细胞膜外囊泡沉淀；

(S6)对上一步骤获得的经PEG修饰的细胞膜外囊泡沉淀进行重悬，从而获得第一重悬混合物；

(S7)对第一重悬混合物进行离心，使所述的经PEG修饰的细胞膜外囊泡沉淀，并弃去上清，获得经PEG修饰的细胞膜外囊泡沉淀；

(S8)对上一步骤中获得的经PEG修饰的细胞膜外囊泡沉淀进行重悬，从而获得可医用的细胞膜外囊泡制剂。

8.一种细胞膜外囊泡制剂，其特征在于，所述的细胞膜外囊泡制剂是用权利要求7所述的方法制备的。

9.一种权利要求1-6中任一项所述的药物组合物或权利要求8所述的细胞膜外囊泡制剂的用途，其特征在于，被用于制备预防和/或治疗炎症、或损伤的药物。

10.如权利要求9所述的用途，其特征在于，所述的炎症选自下组：病毒感染性炎症、细菌感染性炎症、真菌感染性炎症、自身免疫反应性炎症、或其组合；

所述的损伤选自下组：缺血性损伤、缺氧性损伤、化学性损伤、物理性损伤、或其组合。