[发明专利]一种降低辐照灭菌对脱细胞组织破坏作用的方法

说明书

本发明公开了一种降低辐照灭菌对脱细胞组织破坏作用的方法，所述方法包括以下步骤：S1：将脱细胞组织置于交联剂溶液中，搅拌，然后用水洗；S2：向S1水洗后的产物中加入辐照保护剂，所述辐照保护剂为抗坏血酸溶液或抗坏血酸钠溶液，搅拌；S3：将S2的产物依次进行冷冻干燥、γ射线辐照灭菌，灭菌的剂量为15～25kGy，得到能满足手术操作及组织生长所需力学强度的脱细胞组织。本发明采用双重手段对脱细胞组织进行辐照保护，最大化降低了辐照过程对脱细胞组织结构的破坏，保护效果明显且效果稳定，试剂毒副作用很低，残留易控制，适合工业化。

技术领域

本发明属于生物医用材料的加工领域，具体涉及一种降低辐照灭菌对脱细胞组织破坏作用的方法。

背景技术

在临床工作中，天然支架材料的应用越来越广泛，其中脱细胞外基质膜己成为对缺损组织和器官修补用常规支架材料。细胞外基质是组织中除细胞外的所有成分，包括均质状态的基质(蛋白多糖和糖蛋白)和细丝状的胶原纤维，具有连接和支持细胞的作用，还是细胞附着的基本框架和代谢场所，其形态和功能直接影响所构成的组织形态和功能。脱细胞基质是将同种异体组织经过脱细胞工艺处理后，去除能够引起免疫排斥反应的抗原成分，同时完整地保留细胞外基质的三维空间结构及一些对细胞分化有重要作用的生长因子，如成纤维细胞生长因子2、转化生长因子β、血管内皮生长因子等。因此，为了提高脱细胞组织的应用安全性，病毒灭活工艺已成为生产过程中必不可少的环节。对于脱细胞组织来说，如何在灭活病毒的同时又暴扣其活性和力学强度是急需解决的问题。

发明内容

本发明的目的是提供一种降低辐照灭菌对脱细胞组织破坏作用的方法，实现灭活病毒的同时又可以保留脱细胞组织的活性及力学强度。

为了实现上述目的，本发明提供了以下技术方案：

一种降低辐照灭菌对脱细胞组织破坏作用的方法，所述方法包括以下步骤：

S1：将脱细胞组织置于交联剂溶液中，搅拌，然后用水洗；

S2：向S1水洗后的产物中加入辐照保护剂，所述辐照保护剂为抗坏血酸溶液或抗坏血酸钠溶液，搅拌；

S3：将S2的产物依次进行冷冻干燥、γ射线辐照灭菌，灭菌的剂量为15～ 25kGy，得到能满足手术操作及组织生长所需力学强度的脱细胞组织。

进一步的，所述S1中交联剂溶液为碳化二亚胺溶液或戊二醛溶液。

进一步的，所述碳化二亚胺溶液的浓度为10-80mmol/L。

进一步的，所述交联剂溶液是碳化二亚胺溶液，搅拌的温度为0-15℃，搅拌时间为1-12小时。

进一步的，所述碳化二亚胺溶液的溶剂为水或乙醇水溶液。

进一步的，所述戊二醛溶液的浓度为2.5-12.5mg/mL。

进一步的，所述交联剂溶液是戊二醛溶液，所述搅拌温度为15-25℃，搅拌时间为12-14小时。

进一步的，所述S2中辐照保护剂为抗坏血酸溶液时，抗坏血酸溶液的浓度为0.5-5mg/mL，搅拌温度为15-25℃，搅拌时间为12-24小时。

进一步的，所述S2中辐照保护剂是抗坏血酸钠溶液时，抗坏血酸钠溶液的浓度为5-10mg/mL，搅拌温度为15-25℃，搅拌时间12-24小时。

进一步的，所述S3中冷冻干燥的时间为24-48小时。

进一步的，所述碳化二亚胺溶液的溶剂为乙醇水溶液时，乙醇浓度为 30％-75％。

进一步的，所述脱细胞组织的制备方法为：

(1)取新鲜动物皮，加入质量分数1～10％的过氧化氢溶液，搅拌，控干废液，加入水清洗，然后脱水；