[发明专利]一种测定全血降钙素原的免疫比浊方法学试剂盒

说明书

本发明公开了一种测定全血降钙素原的免疫比浊方法学试剂盒，其包括R1试剂和R2试剂和降钙素原校准品，R1试剂包括缓冲液、表面活性剂、稳定剂、增敏剂和防腐剂，R2试剂包括标记有降钙素原抗体的乳胶微球颗粒、缓冲液、防腐剂和稳定剂，降钙素原校准品包括降钙素原蛋白、防腐剂、缓冲液和稳定剂。本发明的测定全血降钙素原的免疫比浊方法学试剂盒，能直接将全血样本加入到试剂盒中进行降钙素原的定量检测，不需要将全血样本离心处理，分离出血清或血浆，既能够降低设备成本，又能提高检测的效率，而且本发明的试剂对全血样本中红细胞的抗干扰效果显著，检测的精度高，与采用血清或血浆进行检测的方案相比，检测值偏差小于10％。

技术领域

本发明涉及医学检验技术领域，具体涉及一种测定全血降钙素原的免疫比浊方法学试剂盒。

背景技术

降钙素原(PCT)是由116个氨基酸组成的激素原，分子量大约为12.7kDa。健康人血中仅含有少量的PCT。当严重细菌、真菌、寄生虫感染以及脓毒症和多脏器功能衰竭时它在血浆中的水平升高，自身免疫、过敏和病毒感染时 PCT不会升高，局部有限的细菌感染、轻微的感染和慢性炎症不会导致其升高。PCT反映了全身炎症反应的活跃程度，PCT水平的升高出现在严重休克、全身性炎症反应综合征(SIRS)和多器官功能紊乱综合征(MODS)。PCT(降钙素原)是诊断和动态监控严重细菌性感染的一个高特异、高灵敏的检测指标，优于现有辅助诊断感染类疾病的其他指标如白细胞分类计数和CRP等。 PCT对于感染性急、危重症的快速诊断、动态监测和治疗方案的制定预后判别等，有非常重要的应用价值。

检测PCT的实验室方法有很多，不仅可以定性，亦可以定量。常用的方法有胶乳增强免疫比浊法、放射免疫学分析法、双抗夹心免疫化学发光法 (ILMA)、胶体金比色法、透射免疫浊度法。胶乳增强免疫比浊法是将抗体定向偶联在胶乳表面，待检验的血液样本中的降钙素原与试剂中的抗体特异性结合，形成抗原抗体免疫复合物，使乳胶微球的交联度发生改变，从而使反应体系的浊度发生变化，胶乳试剂可以特异的增大该浊度变化，增大试剂的灵敏度，该浊度变化的高低与样本中降钙素原的含量成正相关。配套仪器能够通过6点定标曲线来计算样本中降钙素原(PCT)的含量。

胶乳增强免疫比浊技术在近几年有了很大的提升发展，从最开始的低灵敏度项目一直发展到现在的高敏乳胶增强比浊试剂，很多技术细节都在成熟，体外诊断试剂的性能高度依赖于生物原材料，目前国内做抗原、抗体的水平都在不断的向国际水平靠近，有些原料的制作水平已经超过国际水平。

现有技术中，采用胶乳增强免疫比浊法检测降钙素原(PCT)，其缺点在于无法对全血样本直接进行降钙素原的检测，需要先进行离心处理，在全血样本中分离出血清或者分离成血浆，因而需要购置相应的离心设备，并消耗一定的离心处理时间，成本更高，且效率低，因而需要对其进行改进。

发明内容

本发明的目的在于针对背景技术中所述的现有技术中无法对全血样本直接进行降钙素原检测，需要分离出血清或血浆，导致设备成本高，检测效率低等问题，提供一种能够解决前述问题的测定全血降钙素原的免疫比浊方法学试剂盒。

为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：一种测定全血降钙素原的免疫比浊方法学试剂盒，其包括R1试剂和R2试剂和降钙素原校准品，R1试剂包括缓冲液、表面活性剂、稳定剂和防腐剂，R2试剂包括标记有降钙素原抗体的乳胶微球颗粒、缓冲液、防腐剂和稳定剂，降钙素原校准品包括降钙素原蛋白、防腐剂、缓冲液和稳定剂。

进一步的方案是，所述的R1试剂中，缓冲液为2-(N-吗啉)乙磺酸(简称为MES缓冲液)和4-羟乙基哌嗪乙磺酸(简称为HEPES缓冲液)，表面活性剂为吐温-20、吐温-80、brij35中的一种或几种，稳定剂为牛血清蛋白 (BSA)、无机盐、金属络合剂、表面活性剂、抗氧化剂中的一种或者几种，防腐剂为抗菌肽、甲基氯异噻唑啉酮、甲基异噻唑啉酮或者多聚赖氨酸中的一种或者几种。