[发明专利]用于荧光假单胞菌高产铁载体的发酵培养基及其发酵培养方法在审
申请号: | 202010184093.3 | 申请日: | 2020-03-17 |
公开(公告)号: | CN111269862A | 公开(公告)日: | 2020-06-12 |
发明(设计)人: | 陈建军 | 申请(专利权)人: | 陈建军 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/38;C12P1/04;C12R1/39 |
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地址: | 730070 甘肃省兰州市安宁区万新路1*** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 荧光 假单胞菌 高产 载体 发酵 培养基 及其 培养 方法 | ||
1.用于荧光假单胞菌高产铁载体的发酵培养基,其特征在于,配方为:糊精13.0-18.0g/L,玉米淀粉酶解液6.0-10.0g/L,丁二酸2.7-3.5g/L,酵母粉2.5-3.5g/L,L-天冬氨酸1.4-2.0g/L,磷酸氢二钾3.0-4.0g/L,磷酸二氢钾1.2-2.0g/L,硫酸镁0.9-1.5g/L,氯化钠0.5-1.0g/L,氯化铁7-13μmol/L,吡啶醇0.8-1.2mg/L,氯化钴0.02-0.04mg/L,硫酸锰0.01-0.02mg/L,三聚磷酸钠36-44μmol/L,H2O2 10-14mmol/L,司盘-60 0.5-1.5g/L。
2.根据权利要求1所述的用于荧光假单胞菌高产铁载体的发酵培养基,其特征在于,所述培养基的初始pH值为6.6-7.0。
3.根据权利要求1所述的用于荧光假单胞菌高产铁载体的发酵培养基,其特征在于,所述配方中玉米淀粉酶解液的制备方法为:将玉米淀粉加水制成浓度为25%的浆液,先加入耐高温α-淀粉酶,在100℃、pH6.5的条件下反应10min后灭活酶;然后加入糖化酶,在55℃、pH4.5的条件下糖化处理24h,离心取上清即为玉米淀粉酶解液。
4.一种荧光假单胞菌的发酵培养方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)将荧光假单胞菌菌株在斜面培养基上活化24h,挑取单菌落接种于10mL种子培养基中,置于摇床上振荡培养24h制得一级种子液;
2)取5mL一级种子液接种于100mL种子培养基中,置于摇床上振荡培养10-15h制得二级种子液;
3)将二级种子液接种到装有权利要求1所述发酵培养基的摇瓶中进行发酵培养,摇瓶装液量为35%-45%,发酵过程中温度控制在28-30℃,转速控制在180-220rpm,发酵时间为36-44h。
5.根据权利要求4所述的一种荧光假单胞菌的发酵培养方法,其特征在于,所述步骤1)中斜面培养基的配方为:蛋白胨16g/L,酵母粉4g/L,葡萄糖5g/L,磷酸氢二钾0.75g/L,硫酸镁1.5g/L,琼脂15g/L,pH值为7.0。
6.根据权利要求4所述的一种荧光假单胞菌的发酵培养方法,其特征在于,所述步骤1)和2)中种子培养基的配方为:蛋白胨16g/L,酵母粉4g/L,甘油15ml/L,磷酸氢二钾1.5g/L,磷酸二氢钾1.0g/L,硫酸镁2.0g/L,pH值为7.0。
7.根据权利要求4所述的一种荧光假单胞菌的发酵培养方法,其特征在于,所述步骤1)和2)中温度控制在26-30℃,转速控制在150-200rpm。
8.根据权利要求4所述的一种荧光假单胞菌的发酵培养方法,其特征在于,所述步骤3)中二级种子液的接种量为:1.5%-2.5%。
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