[发明专利]烟草花叶病毒衣壳蛋白突变体及其应用

权利要求书

1.一种烟草花叶病毒衣壳蛋白突变体，其特征在于包括由SEQ ID No.1所示的氨基酸序列经点突变得到的多肽，其中的点突变为：第103位突变为半胱氨酸，并且所述多肽的羧基末端插入有如SEQ ID No.7所示的RGD1序列。

2.根据权利要求1所述的烟草花叶蛋白衣壳蛋白突变体，其特征在于：它的氨基酸序列如SEQ ID No.5所示。

3.权利要求1或2所述烟草花叶病毒衣壳蛋白突变体的编码基因，所述的编码基因的序列如SEQ ID No.6所示。

4.包含权利要求3所述编码基因的重组表达载体。

5.含有权利要求3所述编码基因的转基因细胞系。

6.一种盘状纳米颗粒，其特征在于：它由序列如SEQ ID No.3或SEQ ID No.5所示的烟草花叶病毒衣壳蛋白突变体自组装形成，并具有双层盘状结构，所述盘状纳米颗粒的直径为18-20nm、高度为4-5nm，并且所述盘状纳米颗粒具有直径为4-5nm的中空通孔。

7.根据权利要求6所述的盘状纳米颗粒，其特征在于：所述盘状纳米颗粒上还修饰有荧光物质，优选的，所述荧光物质通过共价键与所述盘状纳米颗粒结合。

8.根据权利要求6所述的盘状纳米颗粒，其特征在于：所述盘状纳米颗粒上还结合有能与肿瘤细胞特异性结合的靶向物质，优选的，所述靶向物质通过共价键与所述盘状纳米颗粒结合；更优选的，所述共价键为肽键。

9.一种盘状纳米颗粒的制备方法，其特征在于包括：

构建序列如SEQ ID No.3或SEQ ID No.5所示的烟草花叶病毒衣壳蛋白突变体；

将所述烟草花叶病毒衣壳蛋白突变体溶于pH值为9.0-9.5的磷酸钾/β-巯基乙醇缓冲液中，所述磷酸钾/β-巯基乙醇缓冲液包含50-100mmol/L磷酸钾和5-10mmol/Lβ-巯基乙醇，之后于pH值为7.0-7.5、浓度为50-100mmol/L的三(羟甲基)氨基甲烷缓冲液中透析，采用的透析袋的截留分子量为8000-14000，之后以30-100KD超滤离心浓缩至4-5mg/mL，使所述烟草花叶病毒衣壳蛋白突变体自组装形成双层盘状的盘状纳米颗粒，所述盘状纳米颗粒的直径为18-20nm、高度为4-5nm，并且所述盘状纳米颗粒具有直径为4-5nm的中空通孔。

10.如权利要求9所述的制备方法，其特征在于还包括：通过化学修饰方式将荧光物质连接在所述盘状纳米颗粒上，优选的，将所述荧光物质连接在所述盘状纳米颗粒的中空通孔孔壁上。

11.权利要求1或2所述烟草花叶蛋白衣壳蛋白突变体或者权利要求6、7或8所述盘状纳米颗粒于制备药物载体中的用途。

12.一种功能性产品，其特征在于包括权利要求1或2所述的烟草花叶蛋白衣壳蛋白突变体或者权利要求6、7或8所述的盘状纳米颗粒，并且所述产品至少能用于检测和/或治疗肿瘤。