[发明专利]一种青牛胆的繁育栽培方法

权利要求书

1.一种青牛胆的繁育栽培方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)外植体选择：选择生长健壮植株的幼嫩茎段作为外植体，用5-10％的漂白粉浸泡10-20min，无菌水冲洗3-5次；然后再用0.1-0.3％的升汞浸泡6-12min，无菌水冲洗3-5次，用灭菌纸吸干待用；

(2)丛生芽培养：将消毒好的外植体，剪去两端伤口，切成2-3cm的带单芽茎小段，接种在诱导培养基上培养10-16天，每段嫩茎分化出多个不定芽；然后接种于增值培养基上进行增值培养30-40天；

(3)丛生芽生根：将增殖获得的丛生芽分成单芽，接种在生根培养基上，每隔5-7天喷洒一次营养液，持续培养35-50天；

(4)移栽育苗：将生根良好的幼苗移出培养室并置于室温下炼苗3-6天，小心取出小苗，冼净基部培养基，用多菌灵可湿性粉剂2500-3000倍液浸泡消毒10-12min，取出在阴凉处晾10-15分钟后移栽到栽培基质中；

(5)育苗管理：育苗后，每隔1-3天浇水一次，保持培养基质含水量在60-70％，出苗后，每隔10-15天用600-800倍百菌清加800-1000倍乐果配合喷洒，出苗后培育至当年9月份得到青牛胆大苗。

2.根据权利要求1所述的青牛胆的繁育栽培方法，其特征在于，步骤(2)所述诱导培养基为在MS培养基中添加50-65g/L蔗糖、3-6g/L琼脂、0.1-0.5mg/L GA₃、0.06-0.1mg/L NAA。

3.根据权利要求1所述的青牛胆的繁育栽培方法，其特征在于，步骤(2)所述诱导培养温度为23-27℃，湿度为55-65％，光强为1800-2200lx，每天光照10-12h。

4.根据权利要求1所述的青牛胆的繁育栽培方法，其特征在于，步骤(2)所述增殖培养基为在MS培养基中添加40-55g/L蔗糖、3-6g/L琼脂粉、1.2-3.5g/L芦荟甘露聚糖、0.3-0.8g/L活性炭、0.2-1.0mg/L 6-BA、0.1-0.5mg/L GA₃。

5.根据权利要求1所述的青牛胆的繁育栽培方法，其特征在于，步骤(2)所述增值培养温度为22-25℃，光强为2200-2800lx，每天光照10-12h。

6.根据权利要求1所述的青牛胆的繁育栽培方法，其特征在于，步骤(3)所述生根培养基为1/2MS培养基中添加50-60g/L蔗糖、5-10g/L柳汁、3-6g/L琼脂粉、0.3-0.8g/L活性碳、0.3-0.6mg/L赤霉素，PH值为5.8，并于黑暗中培养。

7.根据权利要求1所述的青牛胆的繁育栽培方法，其特征在于，步骤(3)所述营养液包括磷酸二氢钾300-500mg/L、硫酸钾200-300mg/L、20-30mg/L杀菌剂。