[发明专利]基于表面增强拉曼光谱的烟草中三唑酮、三唑醇的检测方法

说明书

本发明公开了一种基于表面增强拉曼光谱的烟草中三唑酮、三唑醇的检测方法，包括步骤：(1)取烟草样品加入纯水浸润，再加入有机试剂，漩涡振荡、离心后，取上层液于新离心管中，依次加入净化剂和盐酸，漩涡振荡、离心后，取有机层吹干，加入纯水复溶，得到待测样品液；(2)将所述待测样品液与团聚剂、纳米金溶胶混合均匀后，通过便携式拉曼光谱仪采集混合液的表面增强拉曼光谱图；(3)分析测得的表面增强拉曼光谱图，获得三唑酮、三唑醇的检测结果。该检测方法无需依赖大型设备，采用便携式拉曼光谱仪结合简单快速前处理技术，检测成本低，适用于现场批量样品的快速筛查。

技术领域

本发明属于三唑酮、三唑醇的检测领域，具体涉及一种基于表面增强拉曼光谱的烟草中三唑酮、三唑醇的检测方法。

背景技术

三唑酮是一种高效、低毒、内吸性强的广谱三唑类杀菌剂，主要用于防治植物真菌病毒如锈病、白粉病等，其在农业生产中使用非常广泛，登记作物包括烟草、小麦、水稻、玉米、花生、番茄、苹果树等。三唑醇为三唑酮的代谢产物，其杀菌活性高于三唑酮，已被作为一种单独药剂在多种作物上登记使用。研究发现，三唑酮及三唑醇会产生神经、生殖和基因毒性，并有致癌和致畸性。为了保证两种农药的科学合理使用，中国等很多国家已明确限定了其在食品及农作物中的最高残留限量，中国烟草总公司相应发布了其在烟叶中的最大残留限量标准。因此，对三唑酮、三唑醇残留量的检测特别是快速检测具有重要意义。

目前，烟草及烟草制品中三唑酮和三唑醇的检测方法主要有气相色谱法、液相色谱—串联质谱法、气相色谱—串联质谱法等。如发明专利CN103698462B中公开了一种液相色谱—串联质谱检测烟草中农药残留的方法，和发明专利CN104458947B公开了一种气相色谱—质谱联用仪检测烟草或烟草制品中农药残留的方法，这些方法具有准确性好、灵敏度高、可以同时测定多种农药残留等优势，但所需仪器设备昂贵、需配备专业技术人员，而且样品前处理复杂、检测时间长。

拉曼光谱(Raman spectra)分析法是基于印度科学家C.V.拉曼(Raman)所发现的拉曼散射效应，对与入射光频率不同的散射光谱进行分析以得到分子振动、转动信息，并应用于分子结构研究的一种分析方法。但因大多数分子通常只有极小的散射截面，导致拉曼散射的信号都非常弱，需要较高的浓度才能获得清晰的拉曼图谱，极大地限制了拉曼光谱在低浓度靶物质水平分析的实际应用。而20世纪70年代发现的表面增强拉曼散射(surfaceenhanced Raman scattering，SERS)效应则可以实现拉曼信号的增强，克服了常规拉曼信号弱的缺点，可在低浓度待测物质甚至是单分子水平上获得高灵敏度的结构信息，具有分析速度快、检测成本低、操作简便等特点，成为一种快速发展的散射光谱技术，是现阶段的研究热点之一。目前利用SERS进行农药残留的分析检测也已引起了越来越多的关注。但烟草体系本身的复杂性以及快速、简便、低成本样品前处理的匹配性需求为烟草样品农药残留的SERS快速检测带来了一定的挑战。

发明内容

本发明的目的是提供一种基于表面增强拉曼光谱的烟草中三唑酮、三唑醇的检测方法，该检测方法采用便携式拉曼光谱仪，并结合快速、简便、低成本的烟草样品前处理技术，适用于现场批量样品的快速筛查。

本发明的技术方案为：

一种基于表面增强拉曼光谱的烟草中三唑酮、三唑醇的检测方法，包括以下步骤：

(1)取烟草样品加入纯水浸润，再加入有机试剂，漩涡振荡、离心后，取上层液于新离心管中，依次加入净化剂和盐酸，漩涡振荡、离心后，取有机层吹干，加入纯水复溶，得到待测样品液；

(2)将所述待测样品液与团聚剂、纳米金溶胶混合均匀后，通过便携式拉曼光谱仪采集混合液的表面增强拉曼光谱图；

(3)分析测得的表面增强拉曼光谱图，获得三唑酮、三唑醇的检测结果。