[发明专利]一种基于发状根培养的根尖压片分析方法

说明书

本发明公开了一种基于发状根培养的根尖压片分析方法，本发明涉及根尖压片技术领域，包括如下步骤：使用镊子取植物根尖一个，放入试管中，用蒸馏水冲洗若干次洗净，向试管内部加入盐酸，静置，再对恒温水浴锅进行加热，加热到指定温度后，将试管放置于恒温水浴锅内部；拿取一个盖玻片放置于桌面上，再将部分植物根尖放置于盖玻片上端外表面，取另一盖玻片进行覆盖，取铅重物碾压在盖玻片上端位置，碾压。该方法能够快速有效的将植物根尖环形外表面附着的盐酸洗净，改变传统的清洗方式，此种清洗方式效果更佳，能够使植物根尖外表面无盐酸残留，便不会影响实验，造成数据的偏差，还能够省时省力，还减轻了施工人员的工作负担。

技术领域

本发明涉及根尖压片技术领域，具体为一种基于发状根培养的根尖压片分析方法。

背景技术

发状根培养是20世纪80年代发展起来的基因工程和细胞工程相结合的一项技术，通过将发根农杆菌中Ri质粒含有的T-DNA整合到植物细胞的DNA上，诱导植物细胞产生毛状根，毛状根属于激素自养型，具有有效成分含量高、生理生化和遗传性稳定、易于进行操作控制等特点，可在离体培养条件下表现出次生代谢产物的合成能力，还能够合成许多悬浮细胞培养所不能合成的物质，某些产物的产量甚至高于正常植物及悬浮细胞培养。

现有的基于发状根培养的根尖压片分析方法，在对根尖压片的分析处理过程中，传统的工艺方法流程采用的蒸馏水直接对植物根尖进行清洗处理，处理过程中，因清洗的不彻底，很容易导致植物根尖外表面还残留大量盐酸，导致实验数据出现偏差，还需重新进行实验数据对比，而且，传统的方法中，采用人工施加压力对植物根尖进行压实，碾压过程费时费力，而且对植物根尖的碾压效果还不佳，不利于植物根尖进行细胞分裂，效果不是很好，便容易造成实验数据的差错，导致数据的不匹对。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供了一种基于发状根培养的根尖压片分析方法，解决了对根尖压片的分析处理过程中，传统的工艺方法流程采用的蒸馏水直接对植物根尖进行清洗处理，处理过程中，因清洗的不彻底，很容易导致植物根尖外表面还残留大量盐酸，导致实验数据出现偏差，还需重新进行实验数据对比，而且，传统的方法中，采用人工施加压力对植物根尖进行压实，碾压过程费时费力，而且对植物根尖的碾压效果还不佳，不利于植物根尖进行细胞分裂，效果不是很好，便容易造成实验数据的差错，导致数据的不匹对的问题。

为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：一种基于发状根培养的根尖压片分析方法，包括如下步骤：

S1、准备工作：准备恒温水浴锅、培养皿、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、吸水纸、显微镜、电脑、搅拌装置、铅重物等以及盐酸、乙酸洋红等；

S2、取材工作：使用镊子取植物根尖一个，放入试管中，用蒸馏水冲洗若干次洗净；

S3、酸化处理：将蒸馏水倒净，向试管内部加入盐酸，静置一段时间；

S4、解离工作：对恒温水浴锅进行加热，加热到指定温度后，将步骤S3中的试管放置于恒温水浴锅内部，解离一段时间；

S5、清洗工作：将适量蒸馏水放置于搅拌装置内部，打开搅拌装置的开关，使搅拌装置进行工作，再将步骤S4中解离的植物根尖放置于搅拌装置中心位置，进行充分搅拌冲洗，将附着在植物根尖的盐酸去除；

S6、切割处理：使用刀片对植物根尖进行切割，切割出根尖的一部分；

S7、碾压处理：拿取一个盖玻片放置于桌面上，再将部分植物根尖放置于盖玻片上端外表面，取另一盖玻片进行覆盖，完成覆盖后，取铅重物碾压在盖玻片上端位置，碾压一段时间；

S8、染色处理：取下铅重物，揭开盖玻片，向植物根尖内部滴入乙酸洋红，再次盖上盖玻片，将部分吸水纸对两个盖玻片进行包裹，取铅重物再次碾压盖玻片；

S9、观察结果：将制定完成的玻片放置于显微镜下，先采用低倍镜进行观察，再使用高倍镜进行观察，查看植物根尖的有丝分裂的结果。