[发明专利]水稻抗稻瘟病基因Pi68(t)紧密连锁分子标记及其应用

权利要求书

1.水稻抗稻瘟病基因Pi68(t)紧密连锁分子标记STS68-7，其特征在于，所述紧密连锁分子标记STS68-7为用STS68-7F引物和STS68-7R引物PCR扩增非洲栽培稻渗入系IL106的片段，目标片段长度131bp，所述STS68-7F引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，STS68-7R引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。

2.权利要求1所述的水稻抗稻瘟病基因Pi68(t)紧密连锁分子标记STS68-7在水稻抗稻瘟病分子标记辅助育种中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，用STS68-7F引物和STS68-7R引物通过PCR扩增在目标水稻材料中扩增出的片段长度为131bp，则目标水稻材料含有抗稻瘟病基因Pi68(t)位点。

4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，用STS68-7F引物和STS68-7R引物通过PCR扩增在目标水稻材料中扩增出的片段长度为136bp，则目标水稻材料不含抗稻瘟病基因Pi68(t)位点；或用STS68-7F引物和STS68-7R引物通过PCR扩增在目标水稻材料中同时扩增出131bp和136bp两个片段，则目标水稻材料为含有抗稻瘟病基因Pi68(t)位点的杂合水稻材料。

5.根据权利要求3或4所述的应用，其特征在于，所述PCR扩增的反应体系20μL，其中含有2×ES Taq Master Mix 10μL、10μM STS68-7F引物1μL、10μM STS68-7R引物1μL、10ng/μL模板DNA 1μL，ddH₂O 7μL；PCR扩增的反应条件为：95℃预变性3min；95℃变性30s，58℃退火30s，72℃延伸30s，共35个循环；最终72℃延伸5min。

6.水稻抗稻瘟病基因Pi68(t)紧密连锁分子标记STS68-15；其特征在于，所述紧密连锁分子标记STS68-15为用STS68-15F引物和STS68-15R引物PCR扩增非洲栽培稻渗入系IL106的片段，目标片段长度165bp，所述STS68-15F引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示，STS68-15R引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示。

7.权利要求6所述的水稻抗稻瘟病基因Pi68(t)紧密连锁分子标记STS68-15在水稻抗稻瘟病分子标记辅助育种中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，用STS68-15F引物和STS68-15R引物通过PCR扩增在目标水稻材料中扩增出的片段长度为165bp，则目标水稻材料含有抗稻瘟病基因Pi68(t)位点。

9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，用STS68-15F引物和STS68-15R引物通过PCR扩增在目标水稻材料中扩增出的片段长度为184bp，则目标水稻材料不含抗稻瘟病基因Pi68(t)位点；或用STS68-15F引物和STS68-15R引物通过PCR扩增在目标水稻材料中同时扩增出165bp和184bp两个片段，则目标水稻材料为含有抗稻瘟病基因Pi68(t)位点的杂合水稻材料。

10.根据权利要求8或9所述的应用，其特征在于，所述PCR扩增的反应体系20μL，其中含有2×ES Taq Master Mix 10μL、10μM STS68-15F引物1μL、10μM STS68-15R引物1μL、10ng/μL模板DNA 1μL，ddH₂O 7μL；PCR扩增的反应条件为：95℃预变性3min；95℃变性30s，62℃退火30s，72℃延伸30s，共35个循环；最终72℃延伸5min。