[发明专利]一种基于胶体金法快速检测结核菌分泌蛋白的方法

权利要求书

1.一种基于胶体金法快速检测结核菌分泌蛋白的方法，其特征在于：本方法通过胶体金法判断人体体液中是否含有活动性结核分枝杆菌基因序列中RD1、RD2以及RD3片段所转译出的分泌蛋白，从而判断是否患有结核病。

2.根据权利要求1所述的一种基于胶体金法快速检测结核菌分泌蛋白的方法，其特征在于：包括如下步骤 ：

步骤一：获取人体体液样品；

步骤二：对人体体液样品进行处理；

步骤三：取一条带有聚合胶金垫的试纸条对处理后的人体体液样品吸收并进行抗原抗体结合反应，检测其是否含有活动性结核分枝杆菌基因序列中RD1、RD2以及RD3片段所转译出的分泌蛋白；

步骤四：试纸条吸收与处理后的人体体液样品结合完成后，室温下静置15分钟，判断结果。

3.根据权利要求2所述的一种基于胶体金法快速检测结核菌分泌蛋白的方法，其特征在于：所述的人体体液样品为痰液或尿液。

4.根据权利要求2所述的一种基于胶体金法快速检测结核菌分泌蛋白的方法，其特征在于：所述的试纸条包括样品垫、聚合胶金垫、硝酸纤维素膜、硝酸纤维素膜检测线、对照线以及吸收垫，所述的试纸条试纸自上而下依次为样品垫、聚合胶金垫、硝酸纤维素膜以及吸收垫，所述的硝酸纤维素膜检测线和对照线设置在硝酸纤维素膜上，所述的硝酸纤维素膜检测线位于对照线下方。

5.根据权利要求4所述的一种基于胶体金法快速检测结核菌分泌蛋白的方法，其特征在于：所述的聚合胶金垫内有特异性活动性结核分枝杆菌抗体捕捉样品抗原和胶金抗体复合物结合形成抗体-抗原-抗体*的三明治夹心法，确保有效的捕捉到样品抗原，所述的硝酸纤维素膜检测线包被检测抗体，对照线包被可与捕捉抗体结合的对照抗体，吸收垫是样品毛细管现象终结的区域。

6.根据权利要求5所述的一种基于胶体金法快速检测结核菌分泌蛋白的方法，其特征在于：所述的特异性活动性结核分枝杆菌抗体为氯金酸标记活动性结核分枝杆菌细胞表面释放的分泌蛋白抗体。

7.根据权利要求5所述的一种基于胶体金法快速检测结核菌分泌蛋白的方法，其特征在于：所述的步骤四中判断结果的依据是：

阳性显示：两条红色反应线，一条位于硝酸纤维素膜检测线区，另一条位于对照线区，阳性结果表示样品中含有活动性结核分枝杆菌基因序列中RD1、RD2以及RD3片段所转译出的分泌蛋白；

阴性显示：一条红色反应线，位于对照线区，硝酸纤维素膜检测线区内无红色反应线，阴性结果表示样品中不含有活动性结核分枝杆菌基因序列中RD1、RD2以及RD3片段所转译出的分泌蛋白；

检测无效：若试纸条都没有出现红色反应线或仅在硝酸纤维素膜检测线区内无红色反应线，表明不正确操作过程或试纸条已变质损坏，需要重试。

8.根据权利要求2所述的一种基于胶体金法快速检测结核菌分泌蛋白的方法，其特征在于：所述的试纸条的最低检出浓度为4ng/ml。