[发明专利]地骨皮UPLC特征图谱的构建方法及地骨皮的检测方法

权利要求书

1.一种地骨皮UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，包括：

(1)分别取地骨皮对照药材、地骨皮乙素对照品、地骨皮甲素对照品，加入溶剂提取或溶解，制得参照物溶液；

(2)取地骨皮粉末，利用甲醇-醋酸混合溶液进行提取，制得供试品溶液；

(3)取预设量的参照物溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪，所述液相色谱仪以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇为流动相A，三氟乙酸水溶液为流动相B进行梯度洗脱，建立地骨皮UPLC特征图谱；

所述梯度洗脱按下述程序进行：

0～5min，流动相A从8％→14％，流动相B从92％→86％；

5～14min，流动相A从14％→25％，流动相B从86％→75％；

14～23min，流动相A从25％→50％，流动相B从75％→50％；

23～26min，流动相A从50％→90％，流动相B从50％→10％；

26～26.1min，流动相A从90％→8％，流动相B从10％→92％；

26.1～30min，流动相A为8％，流动相B为92％。

2.如权利要求1所述的地骨皮UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，步骤(1)包括：

取地骨皮对照药材，精密称定，置具塞容量瓶中，加入50％甲醇-0.5％醋酸的混合溶液，超声处理，放冷，加50％甲醇-0.5％醋酸的混合溶液，离心，滤过，取续滤液，作为对照药材参照物溶液；

另取地骨皮乙素对照品、地骨皮甲素对照品，精密称定，加甲醇溶解，制成每1ml含80-100μg的混合溶液，作为对照品参照物溶液。

3.如权利要求2所述的地骨皮UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，所述地骨皮对照药材的取样量为0.5-1g，先加入50％甲醇-0.5％醋酸的混合溶液的量为20-30ml，超声处理后加入50％甲醇-0.5％醋酸的混合溶液的量为5-10ml；

所述50％甲醇-0.5％醋酸的混合溶液中，50％甲醇与0.5％醋酸的用量比为(1-2):(1-2)；

所述超声处理的功率为400-600W，频率为30-50KHz。

4.如权利要求1所述的地骨皮UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，步骤(2)包括：

取地骨皮粉末，过筛，精密称定，置离心管中，加入50％甲醇-0.5％醋酸的混合溶液，超声处理，离心，取上清液转移至量瓶中，重复提取2-3次，残渣用适量50％甲醇-0.5％醋酸的混合溶液洗涤，合并提取液，再加50％甲醇-0.5％醋酸的混合溶液，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。

5.如权利要求4所述的地骨皮UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，所述50％甲醇-0.5％醋酸的混合溶液中，50％甲醇与0.5％醋酸的用量比为(0.5～1.5)：1；

所述超声处理的功率为400-600W，频率为30-50KHz。

6.如权利要求1所述的地骨皮UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，步骤(3)中，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，柱长为100mm，内径为2.1mm，粒径为1.7μm，柱温为40-42℃，流速为每分钟0.25ml，检测波长为278-285nm；

所述流动相B为浓度为0.05-0.3％的三氟乙酸水溶液。

7.如权利要求1所述的地骨皮UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，所述地骨皮UPLC特征图谱包括7个特征峰，其中，与地骨皮乙素参照物相应的峰为S峰，各特征峰与S峰的相对保留时间应该在规定值的±10％之内，所述规定值包括：峰1为0.473、峰2为0.833、峰4为1.067、峰5为1.508、峰6为1.781、峰7为1.996。