[发明专利]一种重组犬干扰素CaIFN-λ突变体及其应用

说明书

本发明公开了一组重组犬干扰素CaIFN‑λ蛋白，即野生型犬干扰素CaIFN‑λ蛋白的突变体蛋白。其中3种干扰素CaIFN‑λ突变体的生物学活性显著优于野生型犬干扰素CaIFN‑λ。本发明提供的重组野生型犬干扰素CaIFN‑λ蛋白具有优良的抗病毒活性，具有开发成为抗病毒药物和兽医临床应用的巨大潜力和价值。

本申请是中国发明申请“CN201810867859.0，一种重组犬干扰素CaIFN-λ及其应用”的分案申请。

技术领域

本发明属于基因工程、生物工程领域，具体涉及一种重组犬干扰素突变体及其应用。

背景技术

干扰素(Interferon，IFN)是一组由干扰素诱生剂诱导生物细胞产生的具有多种功能的活性蛋白质(主要是糖蛋白)，它们具有广谱的抗病毒、影响细胞生长，以及分化、调节免疫功能等生物活性。干扰素不能直接灭活病毒，而是通过诱导细胞合成抗病毒蛋白(AVP)发挥效应。同时还可增强自然杀伤细胞(NK细胞)、巨噬细胞和T淋巴细胞的活力，从而起到免疫调节作用，并增强抗病毒能力。跟踪调查发现，干扰素在治疗中具有良好的抗病毒和抑制病毒复制等作用，尤其对犬类病毒性疾病具有一定的疗效。

根据产生干扰素细胞来源不同、理化性质、生物学活性和其识别受体的差异，可分为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型。I型干扰素包括IFN-α、IFN-β、IFN-ω，Ⅱ型干扰素仅包括IFN-γ。其中，I型干扰素的抗病毒活性较强，是乙型肝炎等病毒病的有效治疗药物。目前兽医临床使用的犬干扰素均为α干扰素，且主要是从大肠杆菌中获得的基因重组蛋白，仅表现单一亚形，如α-2b等。

λ干扰素(IFN-λ)是最近发现的Ⅲ型干扰素，虽然诱生机制和生物学活性与I型干扰素相似，但两者的基因、结构和受体不同。人IFN-λ包括IFN-λ1、IFN-λ2和IFN-λ3，能有效抑制乙肝病毒、丙肝病毒、疱疹病毒和甲型流感病毒的复制。犬IFN-λ(CaIFN-λ)的研究相对较少。

发明内容

为了克服现有技术中存在的缺陷和不足，本发明提供了一种重组犬干扰素CaIFN-λ及其应用。本发明目的通过以下技术方案来实现：

本发明提供了一组重组犬干扰素CaIFN-λ蛋白，该蛋白为野生型CaIFN-λ的突变体蛋白，在野生型CaIFN-λ序列SEQ ID NO.11的基础上，所述重组犬干扰素CaIFN-λ蛋白包含至少一处以下突变：E84G，T94V，T101M。

在某一具体案例中，所述重组犬干扰素CaIFN-λ蛋白包含2处突变，E84G和T94V、E84G和T101M、或T94V和T101M。

在某一具体案例中，所述重组犬干扰素CaIFN-λ蛋白包含3处突变，E84G，T94V和T101M。

在某一具体案例中，重组犬干扰素CaIFN-λ蛋白的氨基酸序列选自SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.6。

在某一具体案例中，重组犬干扰素CaIFN-λ蛋白的氨基酸序列在选自SEQ IDNO.2、SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.6的序列后加入连接序列GSSSS和标签蛋白HHHHHH。

本发明提供了一种分离的核酸分子，所述核酸分子编码重组犬干扰素CaIFN-λ蛋白；优选的，所述核酸分子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.5所示。

本发明提供了一种表达盒或载体，所述表达盒或载体包含编码重组犬干扰素CaIFN-λ蛋白的核酸分子。

本发明提供了一种重组菌，所述重组菌含有上述核酸分子或表达盒或载体的。

本发明提供了一种重组犬干扰素CaIFN-λ蛋白、编码重组犬干扰素CaIFN-λ蛋白的核酸分子、包含编码重组犬干扰素CaIFN-λ蛋白的核酸分子的表达盒或载体、和/或重组菌在制备重组犬干扰素CaIFN-λ中的用途。