[发明专利]一种大肠菌群快速检测试纸片

说明书

本发明提供一种大肠菌群快速检测试纸片，该试纸片内含有培养基，所述的培养基由检测培养基液、TTC溶液和ONPG溶液混合配制而成。本发明的检测试纸对待检测样品中的大肠菌群进行培养检测，其检测时间短，且可根据颜色改变和产生红色沉淀的标准来判断阳性菌落数，其使用操作方便、快速，检测结果准确可靠。

技术领域

本发明属于大肠菌群的检测技术领域，尤其是涉及一种大肠菌群快速检测试纸片。

背景技术

大肠菌群是指在37℃下能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌，主要来源于人畜粪便。大肠菌群在样品中的含量是检验食品卫生安全的重要指标。目前常用的检测方法有传统发酵法、纸片快速法、滤膜法、酶底物法、聚合酶链式法、荧光原位杂交法，但这些已知检测方法检测时间仍需24h-72h不等，对于工业废水、食品等生产检测而言，大肠菌群检测周期较长，导致大量样品滞留无法及时处理。

目前，现有技术中大肠菌群检测技术例如滤膜法、酶底物法，分子生物需检测法存在成本较高、操作较为繁琐的缺陷；另外，目前纸片法也是大部分领域检测较为常用的方法，但现有的纸片培养基存在需要低温保存的缺点，且现有的用于检测大肠菌群的试纸片其检测时间多数在18h左右出结果，对于野外紧急作业来说时间较长，不适宜应急使用；申请号201410131441.5的一种分光光度法快速检测大肠菌群的方法及应用的专利文件中公开了一种培养液加样培养60min-400min即可检测样品中的大肠菌群数值，但是该培养液需要配合分光光度计进行使用，且操作条件较高，不适合野外作业。

发明内容

本发明提供一种大肠菌群快速检测试纸片，使该检测试纸片对待检测样品中的大肠菌群进行培养检测，检测时间仅需10-14小时即可得到准确检测结果，且该检测试纸片室温避光保存即可，无需低温保存，适合基层实验室与野外试验使用，同时其检测结果准确可靠。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：一种大肠菌群快速检测试纸片，该试纸片内含有培养基，所述的培养基由检测培养基液、TTC溶液和ONPG溶液混合配制而成。

进一步地，所述的检测培养基液、TTC溶液和ONPG溶液的体积比为100：0.5-2：0.5-2，优选100:1:1。

进一步地，所述的ONPG溶液为质量浓度为0.1％的ONPG溶液。

进一步地，所述的ONPG溶液的配置如下：称取ONPG0.1mg溶解于100mL灭菌蒸馏水中，经0.45μm水系微孔滤膜过滤除菌制得0.1％的ONPG溶液，避光保存。

进一步地，所述的大肠菌群快速检测试纸片的制备方法，包括载体纸片制备、内包装袋、培养基配制、试纸片制作和试纸片包装，其特征在于：所述的培养基配制包括如下步骤：

(a)分别配制检测培养基液、TTC溶液和ONPG溶液；

(b)将配制的检测培养基液、TTC溶液和ONPG溶液混合均匀，避光保存，即得到所述的培养基。

进一步地，步骤(b)中，所述的检测培养基液、TTC溶液和ONPG溶液的体积比为100：0.5-2：0.5-2，优选100:1:1。

进一步地，步骤(a)中，所述的ONPG溶液的配置如下：称取ONPG0.1mg溶解于100mL灭菌蒸馏水中，经0.45μm水系微孔滤膜过滤除菌制得0.1％的ONPG溶液，避光保存。

进一步地，步骤(a)中，所述的检测培养基液配置如下：将50-90μL 2％溴甲酚紫溶液、4g胰蛋白胨、0.5g乳糖、0.5g D-甘露醇、0.75g NaCl、0.02g十二醇硫酸钠、0.01g脱氧胆酸钠、0.5g琼脂加入到100mL蒸馏水中，pH6.9-7.1，115℃，15min灭菌后待用；所述的TTC溶液的配置如下：称取2mgTTC加入到100mL灭菌蒸馏水中溶解，经0.45μm水系微孔滤膜过滤除菌制得2％溶液，避光保存备用。