[发明专利]抗心包积水综合征卵黄抗体的制备方法及相应抗体的用途在审
申请号: | 202010198005.5 | 申请日: | 2020-03-19 |
公开(公告)号: | CN111333721A | 公开(公告)日: | 2020-06-26 |
发明(设计)人: | 王振华;杨锴;崔一;陈淑芳;高欣召;王瑾 | 申请(专利权)人: | 河北科星药业有限公司 |
主分类号: | C07K16/08 | 分类号: | C07K16/08;C07K16/02;A61P31/20;A61P9/00 |
代理公司: | 石家庄科诚专利事务所(普通合伙) 13113 | 代理人: | 刘谟培;刘兰芳 |
地址: | 050200 河北省*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 心包 积水 综合征 卵黄 抗体 制备 方法 相应 用途 | ||
1.一种抗心包积水综合征卵黄抗体的制备方法,其特征在于:该抗体的制备方法按照以下步骤顺序进行:
S1.免疫抗原的制备
将检测为心包积水综合征的鸡病料组织,按1∶3的重量体积比加入无菌生理盐水,反复打磨混匀,得到混合液;将混合液置于冰箱中,反复冻融3次经过滤后得到的滤液进行离心,收集上清液并过滤、除菌,加入甲醛溶液灭活,得到免疫抗原;
S2.高免疫蛋的获得
选取健康产蛋鸡连续注射步骤S1中制得的免疫抗原,免疫三次,免疫间隔为14天,用量为1mL/只/次;完成第三次免疫7天后,经AGPT检测血清抗体,滴度≥64,开始收集高免疫蛋;
S3.卵黄抗体的制备
分离高免疫蛋卵黄,倒入无菌容器内,按体积比1:5~1∶9加入无菌水稀释卵黄液,充分搅拌,用盐酸调pH值至5.0~6.5,继续搅拌得到卵黄混合液;然后将卵黄混合液静置4-5h或静置过夜;之后收集卵黄混合液中的上清液,经超滤浓缩后得到浓缩液,之后在浓缩液中加入甲醛溶液,制得抗抗心包积水综合征卵黄抗体。
2.根据权利要求1所述的抗心包积水综合征卵黄抗体的制备方法,其特征在于:所述步骤S1中的冰箱温度为-80℃。
3.根据权利要求2所述的抗心包积水综合征卵黄抗体的制备方法,其特征在于:所述步骤S1中的离心转速为12000rpm,离心时间为10min。
4.根据权利要求3所述的抗心包积水综合征卵黄抗体的制备方法,其特征在于:所述步骤S1中的甲醛溶液浓度为10%,滤液中加入10%甲醛溶液后的甲醛终浓度为0.1%。
5.根据权利要求1-4中任意一项所述的抗心包积水综合征卵黄抗体的制备方法,其特征在于:所述步骤S1中的灭活温度为37℃,灭活时间为24h。
6.根据权利要求5所述的抗心包积水综合征卵黄抗体的制备方法,其特征在于:所述步骤S3中的盐酸溶液浓度为10%。
7.根据权利要求1-4、6中任意一项所述的抗心包积水综合征卵黄抗体的制备方法,其特征在于:所述步骤S3中的甲醛溶液浓度为10%,浓缩液中加入10%甲醛溶液后的甲醛终浓度为0.1%。
8.根据权利要求5所述的抗心包积水综合征卵黄抗体的制备方法,其特征在于:所述步骤S3中的甲醛溶液浓度为10%,浓缩液中加入10%甲醛溶液后的甲醛终浓度为0.1%。
9.抗心包积水综合征卵黄抗体的一种用途,其特征在于:所述抗心包积水综合征卵黄抗体为由权利要求1-9中任一项所述的抗心包积水综合征卵黄抗体的制备方法制得,所述抗心包积水综合征卵黄抗体用于制备预防和治疗鸡心包积水综合征的药物。
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