[发明专利]一种星毛冠盖藤总香豆素的制备方法及其应用

说明书

本发明旨在提供一种提取制备星毛冠盖藤中总香豆素的方法，通过醇提、加入硅藻土并蒸干；再依次经正己烷或环己烷回流提取、丙酮萃取、过硅胶色谱柱、薄层色谱检视得到。本发明还要求保护按照上述方法制备得到的总香豆素提取物及该提取物用于制备抗肿瘤医药的用途。本发明提取方法操作简单，针对性强，总香豆素提取效率和提取含量都比较高，且具备较好的抑制人肝癌HepG2细胞、人结肠癌HT‑29细胞、人神经胶质瘤U87细胞及人乳腺癌MDA‑MB‑231细胞的医药功能。

技术领域

本发明属于医药技术领域，涉及天然中药的分离，具体涉及一种星毛冠盖藤总香豆素的制备方法及其应用。

背景技术

星毛冠盖藤(PileostegiatomentellaHand.Mazz)为绣球花科冠盖藤属植物，《中华本草》、《广西药用植物名录》和《广西植物志》均将其收载，是广西金秀瑶族自治县瑶医医院肿瘤科用于治疗各种肿瘤的主药。

目前，关于从星毛冠盖藤提取其化学组分的文献公开极少，其中，陆国寿等人发表的《瑶药消瘤藤的化学成分研究》一文中，公开了一种从消瘤藤(即星毛冠盖藤)中提取其化学组分的方法，具体为:将消瘤藤药材15.0kg粉碎成粗粉，加8倍量95％乙醇回流提取5次，每次2h，提取液滤过，合并，回收溶剂并浓缩至无醇味，得浸膏2.91kg。浸膏加水使其混悬，分别依次使用石油醚(60-90℃)，乙酸乙酯萃取，合并各部位萃取液，浓缩，得到石油醚部位浸膏115g，乙酸乙酯部位浸膏106g。取石油醚萃取部分115g，经柱色谱硅胶分离，以石油醚-乙酸乙酯(100:0-80:20)混合溶剂梯度洗脱，得到4个组分(Fr.1-Fr.4)。Fr.1，Fr.2、Fr.3组分均有析出物，分别抽滤，重结晶得到二十四烷酸25mg、蒲公英赛醇33mg、β-谷甾醇26mg。而Fr.4组分2.4g经硅胶柱色谱分离，以石油醚-乙酸乙酯(80:20)为洗脱液，得75个组分(Fr.4.-Fr.4.75)，组分Fr.4.7，Fr.4.11均有析出物，分别抽滤，重结晶得到3β-乙酰氧基-乌苏酸14mg和豆甾烷-3，6-二酮22mg。取乙酸乙酯萃取部分106g经硅胶柱色谱分离，以乙酸乙酯-甲醇(100:0-90:10-80:20-50:50)混合溶剂梯度洗脱，通过薄层色谱检查得到3个组分(Fr.A-Fr.C)。Fr.A组分42.5g经硅胶柱色谱分离，以石油醚-乙酸乙酯(65:35)为洗脱液，得75个组分(Fr.A.1-Fr.A.75)。通过薄层色谱检查合并Fr.A.34-Fr.A.35，通过重结晶得7-羟基-8-甲氧基香豆素200mg。Fr.B组分有析出物，抽滤，重结晶，得到茵芋苷73mg。Fr.C组分29.0g经硅胶柱色谱分离，以石油醚-乙酸乙酯(60:40)为洗脱液，得42个组分(Fr.C.1-Fr.C.42)。通过薄层色谱检查分别合并Fr.C.18-Fr.C.22，Fr.C.39-Fr.C.40，Fr.C.18-Fr.C.22通过重结晶得7-羟基香豆素16mg，Fr.C.39-Fr.C.40通过重结晶得化合物3，4-二羟基苯甲酸44mg。

然而，上述提取方法并非专门针对总香豆素的提取，而是在于提取分离星毛冠盖藤中的多种化学成分；此外，上述提取方法采用15.0kg原料，只提取到含有香豆素的乙酸乙酯部位浸膏106g，最终分离得到的香豆素的含量也比较低。

发明内容

本发明要解决的其中一个技术问题是：针对上述现有技术存在的不足，提供一种有针对性地提取制备星毛冠盖藤中总香豆素的方法，提高总香豆素的提取效率和含量。

本发明以如下技术方案解决上述技术问题：

一种星毛冠盖藤总香豆素的提取制备方法，包括以下具体步骤:

(1)称取星毛冠盖藤，粉碎，加入6-12倍量以碳基醇或碳基醇水组成的溶剂，回流提取1-4次，每次1-3小时，滤过，提取液浓缩成稠膏；

(2)步骤(1)所得稠膏加入2-4倍量硅藻土搅拌均匀，水浴上蒸干，粉碎，得混合样品A；