[发明专利]一种肿瘤个体化特异性的治疗性疫苗及其制备方法

说明书

本发明涉及免疫学领域，公开了一种肿瘤个体化特异性的治疗性疫苗及其制备方法。本发明通过MCTL蛋白质组学树突状细胞集群靶标检测，分析受检者体内的肿瘤特异性分子靶标，体外合成治疗性靶标与培养受检者自体免疫细胞共培养，制得治疗型疫苗。本发明所述治疗性疫苗回输受检者后特异性杀伤肿瘤细胞，重建免疫平衡，实现有效治疗肿瘤的目的，具有广泛的临床应用前景。

技术领域

本发明涉及领域免疫学，特别涉及一种肿瘤个体化特异性的治疗性疫苗及其制备方法。

背景技术

恶性肿瘤是严重影响人类健康、威胁人类生命的主要疾病之一。其早期诊断、及时治疗非常重要。近20年医学诊断技术发展非常迅速，新的诊断方法不断涌现，不仅可以发现小到0.5-1.0厘米的肿瘤，而且可以对肿瘤的范围做出正确的判断，尽管如此，医生也仅能对中晚期癌症做出临床诊断。

目前肿瘤的诊断主要依靠查体、影像学、病理学以及相关实验室检测。查体是肿瘤诊断的重要部分，在全面、系统检查基础上，结合病史进行重点器官的局部检查。随着医疗诊断技术的发展和诊断仪器的更新，各种影像学检查对肿瘤的诊断也起着重要作用。包括X线透视、摄片、造影、断层扫描，超声波检查，放射性核素扫描以及选择性血管造影等等，主要可为肿瘤提供确切的定位诊断。实验室检查对肿瘤有重要的辅助诊断的作用，包括酶学检查和免疫学检查。免疫学检查是基于癌细胞的新陈代谢与化学组成都和正常细胞不同，可以出现新的抗原物质，如原发性肝癌病人血清中出现的甲种胎儿球蛋白(AFP)、结肠癌的血清癌胚抗原(CEA)、胃癌的胃液硫糖蛋白(FSA)、胃癌相关抗原(GCAA)、а2糖蛋白(а2GP)等。

手术治疗、放疗、化疗是肿瘤常规治疗手段，但肿瘤的转移和复发问题很难突破。对于手术而言，局部治疗彻底，但创伤性较大，对微小病灶和转移病灶无效，术后复发或转移率很高，大约70％的肿瘤患者发现肿瘤时失去手术机会；60％以上患者会在术后2-5年内复发。对于放化疗而言，术后应用放化疗可以减少患者复发率，但由于其毒副反应无法耐受限制了其临床应用；过度的放化疗，损伤并摧毁了患者的免疫系统，加速了肿瘤患者的死亡。

新兴肿瘤治疗方案：

1、基因测序指导下的靶向药物治疗

肿瘤的产生源自于基因的突变而导致的细胞无限增殖。基因检测能够发现突变的基因，进而用于患者选择靶向药物。然而最新研究发现，基因测序指导下的靶向用药效率过低，有效治疗患者比例仅占1.5％，这成为靶向药物治疗的痛点；基因测序指导下靶向药物治疗的难点体现在肿瘤异质性。不论是肿瘤原发灶、转移灶还是肿瘤内部亚克隆之间、转移灶内部亚克隆之间，都存在很强的肿瘤异质性。基因检测，只针对EGFR、KRAS、ERCC1、RRM1、HER2等进行突变位点检测，阳性检出率很低，能够选择的抗体药物有限且多为针对单一靶点的靶向药物，极易产生耐药性，不能实现多靶点长效打击，这也是靶向药疗效不明显以及治疗后复发的主要原因。

2、细胞免疫治疗

肿瘤细胞免疫治疗作为一种新型的抗癌治疗方法，运用生物技术和生物制剂对从病人体内采集的免疫细胞进行体外分选、诱导、培养和扩增后再回输到病人体内，直接作用于肿瘤细胞或通过激发、增强机体自身免疫功能达到治疗肿瘤的目的。然而，尽管肿瘤细胞免疫治疗已经被公认是继三大传统肿瘤治疗之后的第四种疗法，但其仍存在不容忽视的问题：

(1)技术落后

目前国内80％医院开展的是第一代、第二代非特异性自体免疫细胞治疗技术，如NK、CIK细胞；而应用特异性的细胞免疫治疗技术较少。

(2)肿瘤特异性抗原少

DC-CIK细胞技术中对树突状细胞(DC细胞)进行抗原负载，所使用的抗原绝大部分是肿瘤组织裂解物、肿瘤细胞系或国内外报道的抗原。这些抗原存在的最大的问题就是没有进行特异性的筛选，即没有在正常组织库和肿瘤组织库上进行特异性筛选，绝大部分都存在交叉反应，特异性差，很难使DC细胞在体外高效扩增并成熟，很难诱导出特异性的CTL。