[发明专利]非压迫型腰椎间盘髓核突出症动物模型的建立

说明书

一种非压迫型腰椎间盘突出症动物模型的建立方法，该方法包括：S1，距大鼠尾根部1厘米处切下鼠尾并缝合伤口，获取大鼠尾椎椎间盘髓核；S2，切开大鼠尾椎椎间盘纤维环，髓核呈胶冻样，取5个髓核和50µl生理盐水充分混合稀释成混悬液；S3，将20µl髓核混悬液和30µl2%利多卡因注射液注射到腰椎硬膜外腔，使混悬液充斥于神经根周围。本发明利用大鼠尾巴粗大，含有足量椎间盘组织，其髓核呈胶冻状的特点，结合硬膜外穿刺技术，将大鼠自体髓核混悬液注射到腰椎硬膜外腔，制造出髓核组织暴露于血循环及机体免疫系统，证实即使位于大鼠腰椎管内的髓核混悬液没有压迫神经根，但也会出现神经根功能和形态学的变化，证明了本模型的有效性。

技术领域

本发明属于动物医学动物模型建立技术领域，尤其涉及一种非压迫型腰椎间盘髓核突出症动物模型的建立。

背景技术

传统观点认为突出的腰椎间盘髓核压迫神经根是引起坐骨神经痛的原因。近年来，随着人们对腰椎间盘突出症(LDH)认识研究的不断深化，发现即使神经根没有被突出的髓核压迫，也会出现坐骨神经痛，其发病机理并不清楚。人们希望通过建立一种可靠、有效的非压迫型腰椎间盘髓核突出动物模型，通过施加干预因素，准确地观察模型体内产生的变化，探究疾病发生机理，并将研究成果推广到临床，为治疗腰椎间盘突出症提供合理、有效的防治手段。因此，建立一种理想的非压迫型腰椎间盘髓核突出症动物模型对本病机制研究和临床防治具有重要意义。

目前，根据腰椎间盘髓核是否压迫神经根，将腰椎间盘突出症动物模型分为压迫型和非压迫型。压迫型腰椎间盘突出动物模型成熟，而非压迫型腰椎间盘突出动物模型很少。国内外的学者针对非压迫型椎间盘突出的机制特点，已建立了一些动物模型，但这些模型的建立方法比较复杂，对动物损伤大，成功率低，一些模型还存在可重复性差、价格昂贵的缺点。

我们对理想的动物模型要求是①能够重现椎间盘退行性病变的客观规律；②模型动物的生理和解剖特点与人类高度的相似性；③动物模型重复性好，可控性高；④周期短、经济性好、可重复性强、成功率高。

目前常用于腰椎间盘突出症模型的动物中，猴子等灵长类动物虽然更接近人的解剖生理特点，但是这些动物价格高、对实验室条件和设备都有特殊要求，而且实验周期长，不便于大规模采用。而猪、狗大型哺乳动物同样存在价格高、实验周期长和实验场所限制等多方面的缺陷。在各类动物中，Sprague-Dawlay大鼠(又称SD大鼠)的基因与人类比较接近，其脊柱基本构成也与人相似，如L4、L5神经根是坐骨神经的主要组成成分，并且品系完备，有较强的抗感染力和生命力，经济易获得，可大量使用。

中国专利申请“破裂型腰椎间盘突出症的动物模型的建立方法”，专利申请号CN201710682995.8，揭示了一种破裂型腰椎间盘突出症的动物模型的建立方法，该发明以模拟后纵韧带破裂后椎间盘髓核充分接触血运为切入点，通过人为切去软骨终板暴露髓核的方法，创造出髓核组织暴露于血循环及机体免疫系统之中的条件，建立一种可以促进突出的椎间盘重吸收的动物模型。采用手术的方法，把大鼠尾部的椎间盘髓核放置到腰部神经根旁边，做成对神经根的压迫，手术切口较长，必须切除大鼠的腰椎椎板显露出神经组织。这个模型的存在的不足之处是：1、髓核对神经根造成压迫。2、手术创伤大，大鼠死亡率高，有手术本身损伤神经的可能。3、研究的是传统的腰椎间盘髓核突出压迫神经根造成的影响。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的缺陷，提供一种操作简单、成功率高、价格便宜、重复性好、对神经根干扰性小的非压迫型腰椎间盘髓核突出症动物模型的建立方法。

为实现上述目的，本发明提出如下技术方案：一种非压迫型腰椎间盘突出症的动物模型的建立方法，包括以下步骤：

S1，距大鼠尾根部1厘米处切下鼠尾并缝合伤口，获取大鼠尾椎椎间盘髓核；

S2，切开大鼠尾椎椎间盘纤维环，髓核呈胶冻样，取5个髓核和50µl生理盐水充分混合稀释成混悬液；