[发明专利]一种7-羟基-8-甲氧基香豆素标准物质的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种7-羟基-8-甲氧基香豆素标准物质的制备方法，其特征在于，包括以下具体步骤:

(1)渗漉提取：取星毛冠盖藤药材，粉碎成粗粉，置渗漉筒中，加6-12倍量50-95％乙醇溶液浸泡12-24小时，渗漉，收集到原药材10-20倍量的渗漉液，渗漉液浓缩成稠膏；

(2)萃取分段：加入相当于稠膏2-5倍量的0-8％乙醇水溶液使其成为混悬液，再加入相当于混悬液1-2倍量的正己烷萃取3-5次，合并正己烷液，回收溶剂，浓缩至稠膏；

(3)柱层析分离：步骤(2)所得稠膏加2-4倍量柱层析硅胶搅拌均匀，水浴上蒸干，粉碎，得混合样品A；混合样品A过硅胶色谱柱，柱层析硅胶为混合样品A的30-100倍量，以正己烷-乙酸乙酯梯度洗脱，收集流分，采用薄层色谱进行检视，合并可检测到7-羟基-8-甲氧基香豆素成分的流分，回收溶剂，浓缩，得7-羟基-8-甲氧基香豆素粗品；

(4)纯化：7-羟基-8-甲氧基香豆素粗品再次加入2-4倍量柱层析硅胶搅拌均匀，水浴上蒸干，粉碎，得混合样品B；混合样品B再过硅胶色谱柱，柱层析硅胶为混合样品B的30-100倍量，以正己烷-乙酸乙酯等度洗脱，收集流分，采用薄层色谱进行检视，收集只含有7-羟基-8-甲氧基香豆素成分的流分，回收溶剂，浓缩，得7-羟基-8-甲氧基香豆素纯品；

本发明所述的倍量均以质量计。

2.根据权利要求1所述的7-羟基-8-甲氧基香豆素标准物质的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述乙醇溶液的体积百分比为85-95％。

3.根据权利要求1所述的7-羟基-8-甲氧基香豆素标准物质的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述乙醇水溶液的体积百分比为3-5％。

4.根据权利要求1所述的7-羟基-8-甲氧基香豆素标准物质的制备方法，其特征在于，步骤(3)所述正己烷-乙酸乙酯的洗脱梯度为100:0→95:5→90:10→80:20→70:30→50:50；所述收集流分按照一份流分为硅胶色谱柱柱体积的1/4-1/2量进行收集。

5.根据权利要求1所述的7-羟基-8-甲氧基香豆素标准物质的制备方法，其特征在于，步骤(4)所述正己烷-乙酸乙酯的等度洗脱的流动相组成比例为90:10-70:30；所述收集流分按照一份流分为硅胶色谱柱柱体积的1/4-1/2量进行收集。

6.权利要求1-5任一项所得到的7-羟基-8-甲氧基香豆素纯品作为标准物质应用于药品或食品生产流通领域中相关产品中7-羟基-8-甲氧基香豆素成分的检测用途。