[发明专利]一种单分子水平上的循环肿瘤DNA的分析方法在审
申请号: | 202010207551.0 | 申请日: | 2020-03-23 |
公开(公告)号: | CN111304297A | 公开(公告)日: | 2020-06-19 |
发明(设计)人: | 盖宏伟;武张健;刘晓君 | 申请(专利权)人: | 江苏师范大学 |
主分类号: | C12Q1/6834 | 分类号: | C12Q1/6834 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 221009 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 分子 水平 循环 肿瘤 dna 分析 方法 | ||
1.一种单分子水平上的循环肿瘤DNA的分析方法,其特征在于:包括如下步骤:
1)根据待测ctDNA序列,在量子点1(QD1)表面修饰单链DNA1(ssDNA1),加入两端序列与ssDNA1互补的单链DNA2(ssDNA2)构建DNA三螺旋分子开关(THMS),同时在量子点2(QD2)表面修饰单链DNA3 (ssDNA3);
2)将THMS-QD1和ssDNA3-QD2加入ctDNA样品中,形成THMS-QD1@ctDNA@ssDNA3-QD2二聚体;
3)取上述体系中溶液滴于载玻片上,置于荧光光谱显微镜下成像;
4)以量子点的激发波长照射在载玻片上,在照射过程中记录量子点的成像情况;
5)一级条纹光谱分裂为两条的光斑是量子点二聚体;
一级条纹光谱不分裂的为单个量子点;
记算量子点二聚体占光斑总数的比例,将此比例作为定量依据。
2.据权利要求1所述的一种单分子水平上的循环肿瘤DNA的分析方法,其特征在于,步骤2)中的二聚体结构进行循环肿瘤DNA检测,检测限摩尔浓度达到皮摩级别。
3.根据权利要求1所述的一种单分子水平上的循环肿瘤DNA的分析方法,其特征在于,所述的量子点能够发生光谱蓝移,包括但不限于半导体核壳量子点。
4.根据权利要求1所述的一种单分子水平上的循环肿瘤DNA的分析方法,其特征在于,所述的量子点二聚体通过量子点零级光斑所对应的一级条纹是否发生分裂进行判断,发生光谱分裂的光斑为二聚体。
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