[发明专利]实验室海月水母水螅体的微观饲养方法

说明书

本发明涉及水螅体实验室养殖技术领域，提供了实验室海月水母水螅体的微观饲养方法，包括人工海水配置、饵料准备、海月水母水螅体转移、海月水母水螅体附着、海月水母水螅体喂食、人工海水更换、传代培养七个步骤。本发明选用六孔培养板或单个的培养皿作为培养器具，海月水母水螅体数量可控、可数，并且喂食、换水等操作方便易达标，同时选用控制精度更高的生化培养箱作为培养仪器，一方面解决了当前实验室饲养水缸在恒温控制、精准定量投食、水质净化等方面都难以达到实验动物饲养的标准的难题；另一方面，水螅体定量和传代培养容易，既提高了水螅体的活力又解决了传统的饲养方式无法开展水螅体相关的精确定量的科研实验的问题。

技术领域

本发明属于海月水母水螅体的实验室培养领域，具体涉及一种实验室海月水母水螅体的微观饲养方法。

背景技术

水螅体是刺胞动物门生物水母生长周期中最为重要的一种世代，为无脊椎动物，多见于海水，少数种类产于淡水。海月水母水螅体由于其生物结构简单，繁殖速度快，再生能力强等特点常作为基础研究的动物模型。因此，海月水母水螅体在生物、化学、医学等科研领域是一类极具研究潜力的动物。

关于水螅体的养殖，实验室通用的饲养方式为波纹板附着+循环过滤水缸的饲养方法，但该种饲养方式较为粗犷且缺陷明显：首先，水缸在恒温控制、精准定量投食、水质净化等方面都达不到实验动物饲养的标准；其次，传统的饲养方式由于饲养缸水体过大，波纹板附着的水螅体数量众多(参见图1)等缺点，导致无法开展水螅体相关的精确定量的科研实验。

发明内容

本发明是为解决上述问题而进行的，为满足使用水螅体进行基本科研实验的需求，提供了一种同细胞培养类似的，能够在生化培养箱中进行恒定条件培养的微观环境下水螅体的饲养方法。为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案如下：

本发明提供的实验室海月水母水螅体的微观饲养方法，具有如下技术特征，包括如下步骤：

S1：人工海水配置

配置盐度在2.8％～3.2％范围内的人工海水，持续泵入空气后，静置取上清液；

S2：饵料准备

将配制好的人工海水和丰年虾卵倒入虾卵孵化器中，丰年虾卵的加入量为g/L(优选10g/L)；将充气泵伸入孵化器内的人工海水液面底部充气进行供氧，并采用加热棒保持孵化器内温度高于26℃，照明条件下孵化24～48h，完成孵化；静置后，取出位于底部的孵化完成的丰年虾卤虫，并进行多次清洗去除杂质；将丰年虾卤虫和人工海水按体积比为1:3人对丰年虾卤虫进行稀释，进行投喂或保存；

S3：海月水母水螅体转移

暂停饲养缸内的海水循环，将缸内波纹板上的部分水螅体转移至盛有人工海水的实验室器皿内，并清除附着的杂质；将清洗干净的水螅体吸入干净人工海水内，进行状态恢复，选取触手伸展、活力良好的水螅体放入盛有人工海水的六孔细胞培养板或培养皿中，六孔细胞培养板中每孔5～10只水螅体，培养皿内放入20～30只水螅体，而后盖上盖子，记录种植日期；

S4：海月水母水螅体附着

将种植水螅体的六孔细胞培养板或培养皿置于20℃的恒温生化培养箱中，并且在附着的5～7天之内不需换水，不需喂食；种植5～7天后，观察水螅体是否已经附着在板底，若附着量偏少，按照所述步骤3重新进行加种。

观察水螅体是否已经附着在板底的判断标准如下：

若水螅体触手伸展，并且用吸管轻轻吹吸水螅体依然附着，则判定该水螅体已经附着在板底；若水螅体触手消失，用吸管吹吸时水螅体飘起，则判定水螅体未附着，

当水螅体的附着数量少于3个时，需重新进行加种。

S5：海月水母水螅体喂食