[发明专利]一种共价有机骨架材料原位修饰电极及电化学生物传感器

权利要求书

1.一种电化学生物传感器，其特征在于，所述电化学生物传感器的制备方法包括如下步骤：

(1)制备工作电极：

电极预处理：预先利用氧化铝粉末对玻碳电极进行抛光，然后进行清洗；将处理好的电极置于对氨基苯甲酸缓冲液中进行电聚合，结束后将其放置于乙二胺溶液中，在EDC和NHS存在下进行反应，得到表面修饰有氨基的玻碳电极；

电极表面原位生长TpBD：将表面修饰有氨基的工作电极置于含1,3,5-三醛基间苯三酚的溶液中，室温下进行反应，反应结束后取出电极，清洗除去游离的1,3,5-三醛基间苯三酚单体，得到修饰有单体1,3,5-三醛基间苯三酚的电极Tp-GCE；然后将所得Tp-GCE置于含有1,3,5-三醛基间苯三酚和联苯胺的溶液中，室温下进行反应，得到表面键合有共价有机骨架材料TpBD的玻碳电极，记为TpBD-GCE工作电极；

(2)制备信号探针修饰的磁纳米粒子：首先将羧基化磁纳米粒子活化，然后加入氨基修饰的目标物质相应的适配体，基于羧基与氨基间的作用将适配体链修饰在磁珠上，磁分离后，加入修饰有电活性分子二茂铁的信号探针，根据碱基互补配对原则，将信号探针结合在适配体链上，得到含有信号探针/适配体/磁纳米粒子复合物的溶液；

(3)向步骤(2)所得的信号探针/适配体/磁纳米粒子复合物溶液中加入目标物质样品，目标物质与适配体结合而将信号探针竞争下来；

(4)将步骤(1)所得的TpBD-GCE工作电极浸入到步骤(3)的溶液中，形成电化学生物传感器。

2.根据权利要求1所述的电化学生物传感器，其特征在于，所述步骤(1)中是将表面修饰有氨基的工作电极置于含1,3,5-三醛基间苯三酚的溶液中，室温下反应2h后取出电极。

3.根据权利要求1所述的电化学生物传感器，其特征在于，所述步骤(1)中含1,3,5-三醛基间苯三酚的溶液中1,3,5-三醛基间苯三酚的浓度为15mmol/L。

4.根据权利要求1所述的电化学生物传感器，其特征在于，所述步骤(1)中的电聚合试剂为对氨基苯甲酸。

5.根据权利要求1所述的电化学生物传感器，其特征在于，所述步骤(1)中的电聚合是在0.4V～1.2V的电位区间内，采用循环伏安法，以10mV/s的扫描速度进行。

6.根据权利要求5所述的电化学生物传感器，其特征在于，所述电聚合的扫描圈数为2圈。

7.根据权利要求1所述的电化学生物传感器，其特征在于，所述步骤(1)中的清洗为超声处理；具体是利用硝酸、乙醇和水的混合体系进行处理。

8.一种共价有机骨架材料原位修饰的电极，其特征在于，所述电极的制备方法包括如下步骤：

(1)电极预处理：预先利用氧化铝粉末对玻碳电极进行抛光，然后进行超声清洗；将处理好的电极置于对氨基苯甲酸缓冲液中进行电聚合，结束后将其放置于乙二胺溶液中，在EDC和NHS存在下进行反应，得到表面修饰有氨基的玻碳电极；

(2)电极表面原位生长TpBD：将表面修饰有氨基的工作电极置于含1,3,5-三醛基间苯三酚的溶液中，室温下进行反应，反应结束后取出电极，清洗除去游离的1,3,5-三醛基间苯三酚单体，得到修饰有单体1,3,5-三醛基间苯三酚的电极Tp-GCE；然后将所得Tp-GCE置于含有1,3,5-三醛基间苯三酚和联苯胺的溶液中，室温下进行反应，得到表面键合有共价有机骨架材料TpBD的玻碳电极。

9.权利要求1-7任一所述的电化学传感器或者权利要求8所述的电极在电化学检测领域中的应用。

10.一种检测黄曲霉毒素M1含量的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

(a)构建权利要求1-7任一所述的电化学生物传感器，将不同浓度的黄曲霉毒素M1加入到含有信号探针/适配体/磁纳米粒子复合物的溶液中，磁分离后，取上清液；将制备的TpBD-GCE工作电极浸入上清液中，取出后采用差分脉冲伏安法在PBS缓冲液中进行电化学测试；以所得峰电流值与黄曲霉毒素M1的浓度构建线性关系，即得黄曲霉毒素M1的标准曲线；

(b)利用未知黄曲霉毒素M1含量的待测样品测得相应的峰电流值，根据步骤(1)所得的标准曲线，得到待测样品中黄曲霉毒素M1的含量。