[发明专利]一种检测肿瘤产生原始生殖细胞能力和效率的方法及用途

权利要求书

1.一种检测肿瘤产生原始生殖细胞能力和效率的方法,其特征在于，其包括，

1)利用来源于患者的肿瘤组织做原代培养及传代培养，检测其形成PGC样的细胞的能力及形成的效率，预测肿瘤是否具有转移能力以及转移能力的大小；

2)检测肿瘤组织或者肿瘤组织的培养物中与激活PGC样细胞形成相关的单个基因或者多个基因表达的变化，预测肿瘤转移能力。

2.按权利要求1所述的方法，其特征在于，所述检测基因包括：用化学法检测碱性磷酸酶的表达(Alkaline phosphatase，AP)；用免疫组化、免疫荧光、Western blot或流式细胞术检测：Octamer-binding transcription factor 4(Oct4),Sox2,Nanog,Stellar/Stella,Nanos Homolog 3(NANOS3),Stage-specific embryonic antigen-1(SSEA1),Fragilis(also known as mouse interferon-induced protein like gene-1,mil-1/interferon-induced transmembrane protein 3,Ifitm3),c-Kit,Synaptonemal complexprotein3(Scp3),Blimp1(also as PRDM1)、Sox17、Synaptonemal complex protein1(Scp1),PRDM14,Deleted in azoospermia-like(DAZL),Mvh(also known as Vasa),AP。用RT-PCR方法检测Oct4,Sox2,Nanog,Stellar,Nanos3,Blimp1、PRDM14、Sox17、IFITM3、SCP1、SCP3、c-Kit、DAZL、VASA、AP。

3.按权利要求1所述的方法，其特征在于，所述检测还包括肿瘤组织和体液包括血液、脑脊液、尿液、胸腔积液、肿瘤穿刺液中激活PGC样细胞形成相关的基因表达。

4.按权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的与激活PGC样细胞形成相关的单个基因或者多个基因表达的变化包括Blimp1、SOX17单项和联合的表达量变化用于预测肿瘤转移能力，同时包括与其他指标联合应用预测肿瘤的转移能力。

5.按权利要求1或4所述的方法，其特征在于，所述的基因中：Oct4,Sox2,Nanog,Stellar,Nanos3、Blimp1、SSEA1,PRDM14、IFITM3、Sox17、SCP1、SCP3、c-Kit、DAZL、VASA、AP的表达量在肿瘤组织及肿瘤组织培养物中与肿瘤的转移能力成正相关；在恶性程度较高而无转移能力或转移能力较低的肿瘤组织及肿瘤组织培养物中SOX2的表达量更高，Sox2的极度高表达与肿瘤的转移能力成负相关；联合应用对肿瘤转移能力的预测价值高。

6.权利要求1所述的方法在制备用于预测肿瘤转移能力制品中的用途。

7.按权利要求6所述的用途，其特征在于，其中采用所述的基因与Sox2基因产物的比值作为肿瘤转移能力预测，包括：Blimp1/Sox2比值，Sox17/Sox2比值、AP/Sox2比值，Nanos3/Sox2比值，Stellar/Sox2比值，PRDM14/Sox2、DAZL/Sox2比值，DDX4//Sox2的比值、SCP1/Sox2的比值、Oct4/SOX2、SCP3/SOX2的比值(蛋白或RNA表达量的比值)；比值越大，转移能力越强、预测转移的可信度越大；所述基因表达的检测方法包括WB、免疫组化、免疫荧光、流式细胞术、RT-PCR。

8.按权利要求7所述的用途，其特征在于，所述的基因的表达量包括：和自身内参的比较、和自身内参的比较后再与癌旁组织、和自身内参的比较后再与正常组织相比较。