[发明专利]一种可降解农药残留、降低重金属含量的生物刺激素制备方法

权利要求书

1.一种可降解农药残留、降低重金属含量的生物刺激素制备方法，其特征在于：所述制备方法包括以下步骤：

（1）将盐沼鳞质霉菌在含硒种子培养基中培养，使种子液中的菌体浓度达到4.0×10⁸~5.70×10⁸ CFU/mL；

（2）将（1）中种子液过滤得到的菌丝按照3~5%的接种量接入发酵培养基中进行发酵，控制发酵温度为26~28℃，通过震荡方式提供溶氧环境，发酵3~4 d后，向发酵液中加入0.1~0.2%的壳聚糖，控制发酵温度为28.5~30℃，继续发酵2~3d后，过滤除去发酵液中的菌丝，得到发酵液A；

（3）将（1）中种子液过滤得到的菌丝按照4~6%的接种量接入含有皂荚壳粉的发酵培养基中进行发酵，控制发酵温度为28.5~29℃，通过震荡方式提供溶氧环境，发酵3~4 d后，向发酵液中加入1~2%的乙醇，控制发酵温度为29.5~30.5℃，继续发酵2~3d后，过滤除去发酵液中的菌丝和杂质，得到发酵液B；

（4）将50~65%发酵液A、35~50%发酵液B混合均匀，利用壳寡糖溶液调节混合液pH至6.5~7.0即得到该生物刺激素；

所述盐沼鳞质霉菌（Apophysomyces spartina）保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCCNo.7717。

2.如权利要求1所述的生物刺激素制备方法，其特征在于：所述含硒种子培养基包括硒源0.5~2.5%，碳源1~6.5%，氮源0.5~3%，无机盐0.01~6%，余量为水，自然pH。

3.如权利要求1所述的生物刺激素制备方法，其特征在于：所述种子培养基中的硒源为亚硒酸钠、亚硒酸钾、亚硒酸、二氧化硒中的一种或多种的任意比组合；所述碳源为葡萄糖、蔗糖、乳糖、果糖、麦芽糖、糖蜜中的任意一种或多种的任意比组合；所述氮源为蛋白胨、牛肉膏、酵母膏、酵母粉、玉米浆、豆饼粉、尿素中的任意一种或多种的任意比组合；所述无机盐为磷酸盐、硫酸盐、磷酸二氢盐、磷酸氢二盐中的任意一种或多种的任意比组合。

4.如权利要求1所述的生物刺激素制备方法，其特征在于：所述发酵培养基包括碳源1~6.5%，氮源0.5~3%，无机盐0.01~6%，余量为水，自然pH。

5.如权利要求1所述的生物刺激素制备方法，其特征在于：所述含皂荚壳粉的发酵培养基包括皂荚壳粉3~5%，碳源1~6.5%，氮源0.5~3%，无机盐0.01~6%，余量为水，自然pH。

6.如权利要求1所述的生物刺激素制备方法，其特征在于：所述发酵培养基的碳源为蔗糖、麦芽糖、甘油、淀粉、糖蜜中的任意一种或多种的任意比组合；所述氮源为玉米浆、豆饼粉、尿素、(NH₄)₂SO₄、NH₄Cl、(NH₄)₂HPO₄或NH₄NO₃中的任意一种或多种的任意比组合；所述无机盐为磷酸盐、硫酸盐、磷酸二氢盐、磷酸氢二盐中的任意一种或多种的任意比组合。

7.如权利要求1所述的生物刺激素制备方法，其特征在于：所述的壳聚糖脱乙酰度＞80%。

8.如权利要求1所述的生物刺激素制备方法，其特征在于：所述的皂荚壳粉为脱除皂荚豆后废弃的皂荚外壳经干燥、粉碎后过20目筛得到。

9.如权利要求1所述的生物刺激素制备方法，其特征在于：所述的壳寡糖聚合度为10~20，壳寡糖溶液浓度为任意浓度。