[发明专利]一种AHL信号分子的制备方法及其用途

权利要求书

1.一种群体感应AHL信号分子的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

a、斜面培养：将Methylobacterium rhodesianum H13接种于斜面LB固体培养基，30℃培养24～36h，获得斜面菌体；

b、扩大培养：用接种环挑取所述步骤a获得的斜面菌体接种至LB液体培养基中，30℃，培养24～36h，获得OD₆₀₀＝0.6-0.8的菌液；

c、取所述步骤b中的菌液，1000rpm离心15min取上清液过滤，滤液用乙酸乙酯等体积萃取三次，合并萃取液，氮吹挥发溶剂浓缩，提取液保存于-80°C备用；

所述步骤a中LB固体培养基终浓度组成为：NaCl 10g/L、胰蛋白胨10g/L、酵母粉5g/L，琼脂18～20g/L，溶剂为去离子水，pH值自然；

所述步骤b中LB液体培养基终浓度组成为：NaCl 10g/L、胰蛋白胨10g/L、酵母粉5g/L，溶剂为去离子水，pH值自然。

2. 一种强化微生物降解二氯甲烷的方法，其特征在于，包括：以二氯甲烷为底物，Methylobacterium rhodesianum H13为降解菌，无机盐培养基为介质，外加3OC₈-HSL，在pH＝5.5～10、转速为160rpm、温度为10℃～40℃条件下降解二氯甲烷。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述二氯甲烷的初始浓度为50-1000mg/L，3OC₈-HSL外源添加量0-2400nM。

4. 根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述3OC₈-HSL的制备方法为：以Methylobacterium rhodesianum H13作为菌种制备AHL信号分子生产源，从所述AHL信号分子生产源中提取3OC₈-HSL；所述AHL信号分子生产源为以无机盐培养基作为培养基质的OD₆₀₀为0.6-0.8的Methylobacterium rhodesianum H13的菌液。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述AHL信号分子生产源的制备方法具体包括：

1）斜面培养：将Methylobacterium rhodesianum H13接种于斜面LB固体培养基，30℃培养24～36h，获得斜面菌体；

2）扩大培养：用接种环挑取步骤1）获得的斜面菌体接种至LB液体培养基中，30℃，培养24～36h，获得OD₆₀₀＝0.6-0.8的菌液；

所述步骤1）中LB固体培养基终浓度组成为：NaCl 10g/L、胰蛋白胨10g/L、酵母粉5g/L，琼脂18～20g/L，溶剂为去离子水，pH值自然；

所述步骤2）中LB液体培养基终浓度组成为：NaCl 10g/L、胰蛋白胨10g/L、酵母粉5g/L，溶剂为去离子水，pH值自然。

6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述二氯甲烷的形态为气体。