[发明专利]一种乙醇梭菌蛋白中有机物的含量的检测方法及应用

权利要求书

1.一种乙醇梭菌蛋白中有机物的含量的检测方法，所述检测方法包括采用色谱法检测所述乙醇梭菌蛋白中所述有机物的含量，其特征在于：

采用色谱法检测有机物标准工作溶液，获得标准曲线；

采用色谱法检测待测乙醇梭菌蛋白样品溶液，后根据所述标准曲线计算所述待测乙醇梭菌蛋白样品溶液中有机物的含量；

根据所述待测乙醇梭菌蛋白样品溶液中有机物的含量，计算乙醇梭菌蛋白中有机物的含量；

其中，所述有机物包括乳酸、乙酸、2,3-丁二醇和乙醇。

2.根据权利要求1所述的乙醇梭菌蛋白中有机物的含量的检测方法，其特征在于，所述色谱法采用高效液相色谱仪，所述高效液相色谱仪的条件包括：

色谱柱：包含阳离子交换树脂填料的有机酸色谱柱；

流动相：浓度为0.001～0.05mol/L的硫酸溶液；优选地，所述硫酸溶液经孔径为0.45μm滤膜的过滤，并经超声脱气；

流速：0.6-0.8mL/min；

柱温：50-60℃；

检测器：RID检测器；

色谱柱柱长：150mm；

色谱柱内径：6.5mm。

3.根据权利要求1或2所述的乙醇梭菌蛋白中有机物的含量的检测方法，其特征在于，所述有机物标准工作溶液为乳酸、乙酸、2,3-丁二醇和乙醇的混合标准工作溶液。

4.根据权利要求1或2所述的乙醇梭菌蛋白中有机物的含量的检测方法，其特征在于，所述待测乙醇梭菌蛋白样品溶液的配制步骤为：

(1)将所述乙醇梭菌蛋白与水混合，搅拌均匀，静置，离心，取上清液；

(2)将所述步骤(1)得到的上清液与5-磺基水杨酸溶液混合均匀，离心，取上清液，即得到所述待测乙醇梭菌蛋白样品溶液。

5.根据权利要求4所述的乙醇梭菌蛋白中有机物的含量的检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述乙醇梭菌蛋白的质量和所述水的体积的比例为8-12g:90-110mL，优选10g:100mL；

优选地，所述水为纯水；

优选地，所述步骤(1)中，所述搅拌采用磁力搅拌器；

优选地，所述步骤(1)中，所述静置时间为1.9～2.1h。

6.根据权利要求4所述的乙醇梭菌蛋白中有机物的含量的检测方法，其特征在于，所述步骤(2)中，所述步骤(1)得到的上清液与所述5-磺基水杨酸溶液的体积比为(1～5):1，优选4:1。

7.根据权利要求4所述的乙醇梭菌蛋白中有机物的含量的检测方法，其特征在于，所述步骤(2)中，所述5-磺基水杨酸溶液包含5-磺基水杨酸、浓硫酸和去离子水；优选地，所述5-磺基水杨酸的质量、所述浓硫酸的体积和所述去离子水的体积的比例为(3～6)g；(12～14)mL:(140～260)mL；优选5g:13.89mL:250mL。

8.根据权利要求4所述的乙醇梭菌蛋白中有机物的含量的检测方法，其特征在于，所述步骤(1)和所述步骤(2)中，所述离心采用高速离心机；优选地，所述离心转速为14500～15500转/min；优选地，所述离心时间为2～5min；优选地，所述离心转速为15000转/min；所述离心时间为3min。