[发明专利]结直肠癌的诊断性信息检测系统、方法、质谱检测装置

权利要求书

1.一种结直肠癌的诊断性信息检测系统，其特征在于，所述结直肠癌的诊断性信息检测方法包括：

步骤一，采集清晨空腹外周血3ml于无抗凝剂真空干燥管，先在室温下放置1.5h，然后在室温下用3000g转速离心30min，取上层血清，并保存在-80℃冰柜；

步骤二，对采集的血清样品进行磁珠预处理及蛋白的提取；

步骤三，室温干燥后将靶板放入质谱仪进行飞行时间质谱分析，采用FleXContro13.0软件进行标准品校正后开始样本检测；

所述步骤二中血清样品进行磁珠预处理及蛋白提取的方法，具体包括：

(1)轻摇磁珠1min，得到一个均匀的磁珠溶液；

(2)取5μl磁珠放于200μlPCR管中，并将PCR管放于磁珠分离器，将PCR管在磁珠分离器相邻两孔间移动10～15次；

(3)在磁珠分离器上停留，使磁珠贴壁1min，液体清澈后弃上清液；

(4)重复(2)～(3)步骤两次；

(5)向PCR管中加入磁珠结合缓冲液使磁珠重新悬浮，再加5μl血清样品，用加样枪小心打吸至少10次，混匀；

(6)将磁珠贴壁2min，将上清液移入干净的离心管；

(7)加5μl磁珠稳定液至离心管并混匀，离心提取。

2.如权利要求1所述的结直肠癌的诊断性信息检测方法，其特征在于，所述结直肠癌的诊断性信息检测系统的检测方法中对进行质谱分析的血清总蛋白要求如下：将提取的蛋白多肽用于直接质谱检测或者冻存于-20℃冰箱，24h之内质谱分析。

3.如权利要求1所述的结直肠癌的诊断性信息检测方法，其特征在于，所述步骤三中靶板的制作方法如下：将离心分离收集得到的蛋白样品1μl与10μl的基质α-氰基-4-羟基肉桂酸混匀，取1μl在An-chorchip靶板上，每个样本重复3个复孔。

4.如权利要求1所述的结直肠癌的诊断性信息检测方法，其特征在于，所述步骤三中质谱仪进行飞行时间质谱分析的方法如下：每个样本共450次激光打靶生成质谱图，激光打靶5次点靶，每次打靶3×30次，生成质谱图获得由不同质核比m/z组成的蛋白多肽图谱。

5.如权利要求1所述的结直肠癌的诊断性信息检测方法，其特征在于，所述步骤三中采用FleXContro13.0软件进行标准品校正后开始样本检测的样本检测的方法，具体如下：

1)将质谱仪分析获得的不同质核比(m/z)组成的蛋白多肽图谱进行分类；

2)质核比差别在0.1％范围内的蛋白峰被认为代表相同的肽；

3)运用BioExplorer软件对蛋白多肽图谱数据进行分析，得出检测结果。

6.一种实施权利要求1～5任意一项所述结直肠癌的诊断性信息检测方法的结直肠癌的诊断性信息检测系统，其特征在于，所述结直肠癌的诊断性信息检测系统包括：

血液样本处理模块，与中央控制模块连接，包括无抗凝剂真空干燥管、离心机、冰柜，用于对采集的血液进行离心处理，并进行冷冻备用；

血清总蛋白预处理提取模块，与中央控制模块连接，包括磁珠分离器、PCR管、加样枪，用于通过磁珠分离器对采集的血清样品进行预处理和蛋白的提取；

样品收集模块，与中央控制模块连接，包括电动伸缩杆、标本入口、标本放置架、标本放置台，用于对标本的收集，并将标准传输到飞行时间质谱仪中；

质谱分析模块，与中央控制模块连接，包括飞行时间质谱仪，用于对采集的血清总蛋白进行质谱分析；

电源模块，与血液样本处理模块、血清总蛋白预处理提取模块、样品收集模块、质谱分析模块、中央控制模块连接，用于对各模块的正常运行提供电力支持；

中央控制模块，与血液样本处理模块、血清总蛋白预处理提取模块、样品收集模块、质谱分析模块、电源模块，用于调控各模块的的正常有序运转。