[发明专利]用于检测葱属作物病毒的引物组、试剂、试剂盒、应用和检测葱属作物病毒的方法

说明书

本发明提供了一种用于检测葱属作物病毒的引物组、试剂、试剂盒、应用和检测葱属作物病毒的方法，涉及生物技术领域，本发明提供的用于检测葱属作物病毒的引物组，包括用于检测SVX的引物对、用于检测SLV的引物对、用于检测SYSV的引物对和用于检测OYDV的引物对。在同一个检测体系中加入本发明提供的引物组，能够实现对多种靶标基因的同时检测，并且显著提高了检测效率。本发明提供的检测葱属作物病毒的方法，利用多重PCR同时进行多个病毒的鉴定，既高效又准确，且节约资本，能够为葱属作物组培脱毒奠定基础，为葱属作物生产中的农药减施和安全生产提供技术保障。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其是涉及一种用于检测葱属作物病毒的引物组、试剂、试剂盒、应用和检测葱属作物病毒的方法。

背景技术

病毒对植物的危害十分严重，病毒检测是预防的前提。分蘖洋葱(Allium cepavar.aggregatum)，又称分蘖葱头，俗称毛葱、鬼子葱，为百合科葱属两年生草本植物，是北方地区特色经济作物，具有降血脂、降血压、抗癌、抑菌、消炎等保健功能。近年来，毛葱种植面积逐年增加，吉林省2018年种植面积约为15万亩。分蘖洋葱一般采用无性繁殖，在栽培繁殖时期通常感染多种病毒，造成鳞茎内病毒的大量积累，严重影响其产量和质量。要想有效的控制这类病毒的危害，首先必须建立有效的病原鉴定体系，并明确它们的种类。迄今为止，葱属作物上约有15种病毒被发现，多为马铃薯Y病毒属(Potyvirus)、香石竹浅隐病毒属(Carlavirus)和葱属X病毒属(Allxivirus)。其中洋葱黄矮病毒(Onion yellow dwarfvirus，OYDV)、葱黄条病毒(Shallot yellow stripe virus，SYSV)、香石竹潜隐病毒(Shallot latent virus，SLV)和葱X病毒(Shallot virus X，SVX)四种病毒较为常见，这四种病毒形态结构相似，往往呈复合感染。

OYDV和SYSV隶属于马铃薯Y病毒属，该病毒属较保守。OYDV于1916年由Giddings在美国西弗吉尼亚州发现，1935年，Henderson将此病毒定名为洋葱黄矮病毒。OYDY感染植株后，存在于感病植株的根、叶和鳞茎等各个部分，表现为植株矮化，叶片扭曲变形退绿、叶尖枯萎，后期整个叶片发黄、向下卷曲、起皱及萎缩等症状，OYDV通过蚜虫传播。SYSV为分蘖洋葱感染的主要病毒，感染植株后，通常显现纵向黄色长条纹，植物细胞中可见由柱状内含体组成的“风轮体”和“薄层集结体”。SLV隶属于麝香石竹潜隐病毒，1978年，Bos等在荷兰的青葱中发现SLV，其在寄主上一般隐症，或显现出较轻症状，可由蚜虫以非持久性传播，但寄主范围较狭窄，通常只侵染大蒜和一些葱属植物，分蘖洋葱即为其中之一。SVX为葱属X病毒属最具代表性的病毒，1998年，葱属X病毒属被确立为植物病毒属，其病毒属成员均可侵染分蘖洋葱，且只侵染葱属作物。其侵染的作物症状与麝香石竹潜隐病毒相似，均无明显症状，但是通常危害极大，该属的病毒有可能是通过蜗虫传播，不能通过蚜虫传播。

自然界中环境复杂，受病毒侵染的植物通常都呈现复合侵染。为了保障葱属作物的安全生产，快速、准确地检测葱属作物被病毒侵染的情况尤为重要。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一个目的在于提供一种用于检测葱属作物病毒的引物组，以至少缓解现有技术中存在的技术问题之一。

本发明的第二个目的在于提供一种包含上述引物组的试剂。

本发明的第三个目的在于提供一种包含上述引物组或试剂的试剂盒。

本发明的第四个目的在于提供上述引物组、试剂或试剂盒在检测葱属作物中SVX、SLV、SYSV和OYDV中的应用。

本发明的第五个目的在于提供一种检测葱属作物病毒的方法，能够为葱属作物中SVX、SLV、SYSV和OYDV的检测提供快速有效的手段。